透射电镜是通过透射过样本和放大产生的电子束,投射到照相胶片或在荧光屏观察聚焦的物体的图像。的0.10.2nm的透射电子显微镜的分辨率,在数万的倍率至几十倍。由于电子散射或容易被物体吸收,所以低渗透,必须制备超薄切片较薄(通常为50100nm的)。制备过程类似于石蜡切片,但需要非常严格的。为了赶上了几分钟后,引起了身体的亡,组织块要小(小于1立方毫米),常用戊二醛和饿了双固定酸树脂包埋,切成薄片继发特殊的超薄机(超微)电子切片,然后用乙酸双氧铀和柠檬酸铅染色
电子扫描型电子显微镜的电子束扫描在样品表面微细,得到的集合与一个特殊的检测器,一个电信号被形成输送到阴极在屏幕上射线管显示对象。三维构象(细胞,组织)的表面,照片可以生产。 SEM样品用戊二醛固定和饿酸,脱水和临界点干燥,然后喷涂一薄层的金的试样膜的表面上之后,为了增加在两波的电子的数量。扫描型电子显微镜来观察较大的组织的表面上的结构,因为场深度长,1毫米可以清楚的图像的不平坦表面,这样就把样品富有立体感的图像。
扫描电子显微镜 SEM(scanning electron microscope) 工作原理:
1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,即用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,其中主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的,即使用逐点成像的方法获得放大像。
透射电镜TEM (transmission electron microscope)工作原理:
是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像, 投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。
一、扫描电子显微镜 SEM(scanning electron microscope)的制造依据
扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。当一束高能的人射电子轰击物质表面时,被激发的区域将产生二次电子、俄歇电子、特征x射线和连续谱X射线、背散射电子、透射电子,以及在可见、紫外、红外光区域产生的电磁辐射。
同时,也可产生电子-空穴对、晶格振动 (声子)、电子振荡 (等离子体)。原则上讲,利用电子和物质的相互作用,可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息,如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。
扫描电子显微镜正是根据上述不同信息产生的机理,采用不同的信息检测器,使选择检测得以实现。如对二次电子、背散射电子的采集,可得到有关物质微观形貌的信息对x射线的采集,可得到物质化学成分的信息。正因如此,根据不同需求,可制造出功能配置不同的扫描电子显微镜。
二、透射电镜TEM (transmission electron microscope)的制造依据
透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备更薄的超薄切片(通常为50~100nm)。
其制备过程与石蜡切片相似,但要求极严格。要在机体死亡后的数分钟钓取材,组织块要小(1立方毫米以内),常用戊二醛和饿酸进行双重固定树脂包埋,用特制的超薄切片机(ultramicrotome)切成超薄切片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。
电子束投射到样品时,可随组织构成成分的密度不同而发生相应的电子发射,如电子束投射到质量大的结构时,电子被散射的多,因此投射到荧光屏上的电子少而呈暗像,电子照片上则呈黑色。称电子密度高(electron dense)。反之,则称为电子密度低(electron lucent)。
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