要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

EM菌种活菌制剂根据用途不同（饲料、肥料、水体、垃圾、污水、土壤）、适用环境（温度、适度、ph值、耗氧、厌氧、培养基等条件）不同，按照不同种类的益生菌复配而成，该产品常温保存，细菌活性高，菌种成活时间较长。

制作EM菌种发酵液——EM原液，EM原露，EM菌液

方法如下：

A、菌种活化：取EM菌种10克、红糖0.1公斤、食盐1克、尿素1克、1公斤无菌水（开水放凉就可以）。注：（先把水加热到100°C后加入红塘，而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入EM菌种、食盐、尿素），密闭发酵(35°C—37°C温度)2天，打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。

B、制作原液：将活化好的1公斤液体菌种加入二级发酵罐( 密闭容器 )( 加水比例按1：17的比例加入 ) 。二级发酵时培养基的配方：（10%的红糖--必须添加、10克尿素、10克食盐或10克磷酸二氢钾！发酵温度35-37度！发酵时间2-3天！），从第二天开始可以隔一天松动容器口放气减压一次，打开容器口时闻到有刺鼻子的酸甜味即发酵扩培成功。 成品发酵液标准:（气味：酸甜， PH值：3.0-4.0， 活菌含量：大于100亿/ml ）

参见百度百科：http://baike.baidu.com/link?url=6U6PYc-1uYoLRS4Ft1lBs2cw5f-p7HmWvd_WNy1lSRzG2eNdu8ld8ws3dJOZM54aCSR_8eSsQzyAATzn7Ya5sK

处理细菌菌液时都是怎么做之后再做sds

marker看你买的是什么样的,有的还是粉末状呢,那个用水溶解后也需要加loading buffer沸水浴处理的.不过现在卖的很多都是那种直接点样的.说明书一般都有说的,一般10微升.

loading buffer就是上样缓冲液的英文.

另外,你的实验步骤里面,你打错了,第三步是10000rpm*2min,我非常肯定这个步骤一定是高速离心.

第一个步骤,我们一般取1ml菌液离心10000rpm*5min吧,具体记得不太清楚了.然后加loading buffer好像是120微升,1倍的,100微升也OK啦,然后沸水浴5到10分钟,然后高速离心,点样.为了避免串样,维持各点样孔之间的那种压力吧,具体怎么说我记不清楚了,反正就是防止别的孔的样品跑到空白泳道,很难看的.所以在空白处也点上1倍的loading buffer

你按照一个固定的数字做下来,点样的时候开始要摸索一下,多点几个样,看看点多少微升合适,因为你的菌液浓度什么的我们也不知道.你要有条件,可以给蛋白定量,因为跑电泳蛋白浓度过高会很难看,浓度低了看不清楚.

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