要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

he染色原理是易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性。常用固定液有福尔马林、醋酸、酒精。

对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性，组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点，在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性，细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。

如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性，pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性，所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。常用固定液有的会发生化学反应，所以现用现配更佳。

---