优点:
1、分辨率高,光学显微镜的分辨率为0.2μm,透射电子显微镜的分辨率为0.2nm,也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000倍。
2、透射式电子显微镜常用于观察那些用普通显微镜所不能分辨的细微物质结构;扫描式电子显微镜主要用于观察固体表面的形貌,也能与X射线衍射仪或电子能谱仪相结合,构成电子微探针,用于物质成分分析;发射式电子显微镜用于自发射电子表面的研究。
缺点:
1、在电子显微镜中样本必须在真空中观察,因此无法观察活样本。随着技术的进步,环境扫描电镜将逐渐实现直接对活样本的观察;
2、在处理样本时可能会产生样本本来没有的结构,这加剧了此后分析图像的难度;
3、由于电子散射能力极强,容易发生二次衍射等;
4、由于为三维物体的二维平面投影像,有时像不唯一;
5、由于透射电子显微镜只能观察非常薄的样本,而有可能物质表面的结构与物质内部的结构不同;
6、超薄样品(100纳米以下),制样过程复杂、困难,制样有损伤;
7、电子束可能通过碰撞和加热破坏样本;
8、此外电子显微镜购买和维护的价格都比较高。
扩展资料
生物电镜研究对象:
1、生物体体表及形态研究:主要是通过扫描电镜观察分析比如昆虫体表表面结构(如眼睛、翅膀及体表微结构)及细菌病毒等微生物形态结构、大小等研究。
2、细胞超微结构及超微病理研究:主要通过透射电镜观察分析各种组织中细胞的形态及诸如线粒体、内质网、核糖体、溶酶体、分泌颗粒等细胞器,细胞连接如桥粒连接、紧密连接等,特化结构如纤毛、微绒毛等。
间质成分如胶原纤维,基质结构及血管结构等,还可以通过辅助仪器分析细胞内各种元素的分布情况等。通过连续切片技术进行三维重构对细胞器、细胞连接结构等三维结构进行研究。
3、膜蛋白结构研究:主要通过冷冻电镜和三维重构技术观察分析蛋白形态结构及其成分构成包括各种膜结构蛋白及蛋白定位及定性研究;酶细胞化学研究;抗原抗体研究(胶体金技术)等等。
4、临床超微病理研究:主要通过透射电镜对活检组织进行观察分析,做出病理判断,比如肾脏病疾病分型、肝炎分型、肿瘤组织来源、病毒类型判断等。
参考资料来源:百度百科-电子显微镜
随着社会科学技术的不断发展进步,微区信息已经成为了现代物质信息研究的重要组成部分,环境扫描电子显微镜是近年发展起来的新型扫描电镜。它主要用于各种样品的表面形貌观察和成分分析,具有对试样必须干燥、洁净、导电的要求,广泛地应用于生命科学、医学、材料学等诸多学科。本文主要为大家介绍一下环境扫描电子显微镜的工作原理及应用范围。
环境扫描电子显微镜的工作原理
环境扫描电镜(environmental scanning electron microscopy,ESEM)采用多级真空系统、气体二次电子信号探测器等独特设计。观察不导电样品不需要镀导电膜.可以在控制温度、压力、相对湿度和低真空度的条件下进行观察分析含水的、含油的、已污染的、不导电的样品,减少了样品的干燥损伤和真空损伤。
环境扫描电镜有三种工作方式:A)高真空方式(常规方式);B)低真空方式:0.1~1 Torr;C)环境方式:0.1~20 Torr。
在高真空的常规扫描电镜中,用标准的Everhart Thornley探测器来接受被高能入射电子激发的样品的信号电流(二次电子和部分背散射电子),经放大后形成图像。
在低真空及环扫模式下,由电子枪发射的高能入射电子束穿过压差光阑进入样品室,射向被测定的样品,从样品表面激发出信号电子:二次电子一SE和背散射电子一BSE。由于样品室内有气体存在,入射电子和信号电子与气体分子碰撞,使之电离产生电子和离子。如果我们在样品和电极板之间加一个稳定电场,电离所产生的电子和离子会被分别引往与各自极性相反的电极方向,非导体表面积累的负电荷会与电离出来的正电荷中和而消除荷电。
图1环境扫描电镜中气体放大原理示意图
其中电子在途中被电场加速到足够高的能量时,会电离更多的气体分子,从而产生更多的电子,如此反复倍增。ESEM探测器正是利用此原理来增强信号的,这又称气体放大原理(如图1)。LFD(低真空度模式下使用的探测器)和GSED(环扫模式下使用的探测器)探头接收这些信号并将其直接传到电子放大器放大成电信号去调制显象管或其它成像系统。
ESEM通过不断地向样品室补充气体来维持样品室的低真空,同时也为气体二次电子探测器GSED提供工作气体,水蒸气是最常用的工作气体。但是样品室中气体分子的存在对于SEM的成像也有着副作用,由于气体分子对入射电子的散射使部分电子改变方向,不落在聚焦点上,从而产生图像的背底噪音同时入射电子使气体分子电离,产生电子和离子,也会加大图像的背底噪音.因而偏压电场的电压、方向及电极板的形状,气体状态(种类、压力等)和入射电子路径等因素都会对图像的分辨率产生影响,必须选择适当的参数才能使分辨率的降低保持在最小的限度。不同的探测器应有不同的工作参数。
环境扫描电子显微镜主要特点(以FEI Quanta为例)
1、FEI ESEM(环境扫描电镜)技术,可在高真空、低真空和环境真空条件下对各种样品进行观察和分析。
2、所有真空条件下的二次电子、背散射电子观察和微观分析。
3、先进的系统结构平台,全数字化系统。
4、可同时安装能谱仪、波谱仪和EBSP系统。
5、可安装低温冷台、加热台、拉伸台等进行样品的动态观察和分析。
环境扫描电子显微镜技术参数(以FEI Quanta 250/450/650为例)
1、分辨率:
二次电子:
高真空模式3.0nm 30kV,8nm 3kV
高真空减速模式7nm 3kV(可选项)
低真空模式3.0nm 30kV,10nm 3kV
环境真空模式3.0nm 30kV
背散射电子4.0nm 30kV
2、样品室压力最高达2600Pa
3、加速电压200V~30kV,连续调节
4、样品台移动范围
Quanta 250:X=Y=50mm
Quanta 450:X=Y=100mm
Quanta 650:X=Y=150mm
环境扫描电子显微镜代表性工作
图1杆菌(Bar=10μm) 图2球菌(Bar=10μm)
图3酵母菌(Bar=5μm) 图4链霉菌(Bar=5μm)
图5真菌(桦南牛肝菌)(Bar=20μm) 图6污水处理中颗粒污泥表面微生物多样性(Bar=10μm)
图7水稻叶片表面腊质(野生型)(Bar=5μm) 图8水稻叶片表面腊质(突变体)(Bar=5μm)
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