凝胶电泳分析软件gelpro使用方法2.如何拍摄凝胶的照片?

凝胶电泳分析软件gelpro使用方法2.如何拍摄凝胶的照片?,第1张

正确地拍摄凝胶照片比使用软件更重要。最好是有一台凝胶成像系统,用它来拍摄凝胶图片。用自己的数码相机来拍摄凝胶图片是不行的,如果要作图像分析,就更不行了。

上一篇已经说到凝胶成像系统有三大件,暗箱,相机与电脑上的控制分析软件。就按这个顺序说吧。

暗箱里是四组照片灯光。最常用的是透射紫外灯箱与透射白光板。作过凝胶电泳的同学都用过紫外灯箱,暗箱里也是这东西。紫外灯箱是观察EB染色的核酸电泳的。白光板则用来拍摄SDS PAGE凝胶。

图片:紫外灯箱。注意暗箱后壁上还有块板可以拉下来,那就是白光板。

图片:其实白光板与医院里看X-光片的灯箱是一个道理。看SDS PAGE凝胶就得放在这个上面。放在桌子上自己用数码相机拍张照片是不行的。

1.凝胶要拍大一点,让它充满画面。

2.曝光不能过度。这会导致条带的分析产生错误。此时最亮的条带会呈现为一个大白斑。

3.加样孔放在上面,凝胶块要摆得横平竖直。如果是竖长条的凝胶,也可以横着拍摄,然后用旋转图片的方法把加样孔转到上方。

4.图片要以12位灰度甚至16位灰度保存为TIFF格式。不能存为jpeg图片。下面图片上的那些马赛克就是gpeg惹的祸。

各种凝胶成像系统的具体操作方法当然是不同的,不过它们都是下面这个程序:

1.放入凝胶块,调整其位置,(在后面的过程中还需要细调其位置让它处在画面中间)

2.关上门,打开相对应的灯光。(手控的光源开关在暗箱上,程序控制的在软件的暗箱控件模块上)

3.调整相机镜头的光圈及曝光时间以调整图像亮度,变焦调整图像的放大与缩小,让凝胶图像尽量充满整个画面。还有个对焦距的功能,使图像清晰。

4.拍摄照片。要保存为TIFF图片格式,如果相机够好,还能保存为12位灰度的图片文件。

扫描电镜检测是材料微观形貌观察必不可少的研究手段,但水凝胶材料由于含有大量水分或有机溶剂,无法直接放入电镜中观察。电镜工作需要维持高真空环境,而水分在真空中会迅速挥发,导致图像异常甚至电镜故障。

因此,对于水凝胶样品,通常需要进行冷冻干燥处理,将水分去除后再进行拍摄。

BIO-RAD凝胶电泳成像系统的操作方法

1.接通电源和照相机电源

2.打开开关,预热30分钟

3.打开软件,文件菜单中gel-doc.xr

4.按live/focus,30s后按autoexpose or manualexpose

5.调iris,zoom ,focus调节图像清晰度,之后按freeze拍照,保存。

BIO-RAD 凝胶成像系统 Universal Hood Ⅱ

仪器性能:

拍摄对象:核酸琼脂糖凝胶电泳

X光胶片

软件功能:获取并处理图像

测定图像光密度

操作步骤:

1. 开启成像系统,电脑电源

2. 打开Quality One软件,调整光源所示图像

3. 观察并调整曝光时间,获得图像并保存

4. 调整图像,并对图像进行光密度分析

5. 关闭所有电源


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