观察细胞表面立体结构的技术

观察细胞表面立体结构的技术,第1张

使用扫描电镜SEM,是细胞形态学研究的主要手段。

体视显微镜也可以观测,但放大倍数太低,有效放大几十倍吧,看到细胞应该没有问题,可能影像跟针尖似的,无法看清楚细胞的表面结构,

当前还可以采用激光共聚焦显微镜来观测,分辨率可以达到160nm,有效放大倍数2000倍。通过样品台按照一定步距的升降,每一个步距扫描生成一幅图像。然后把一系列高度的图像在计算机中拟合生成三维形貌。

扫描电镜只能观察放入的样品表面,识别表面信号厚度约为1微米左右,因此用SEM观察必须要线粒体暴露出来。

透射电镜只能观察亚微米级别(<1微米)厚度样品,因此细胞要做切片处理,切出线粒体,或者直接抽提线粒体。

超薄切片:锇酸固定,酒精脱水,甲基丙烯酸甲酯或环氧树脂包埋,最后切片。

冰冻蚀刻术:利用快速冷冻标本,冰刀切割,再铂炭升华。

扩展资料:

电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。

电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由照明系统、成像系统、真空系统、记录系统、电源系统5部分构成,如果细分的话:主体部分是电子透镜和显像记录系统,由置于真空中的电子枪、聚光镜、物样室、 物镜、衍射镜、中间镜、 投影镜、荧光屏和照相机。

参考资料来源:百度百科-透射电子显微镜


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