2、水蒸气和2000多度高温的钨丝反应,会加速电子枪灯丝挥发,极大降低灯丝寿命。
3、对电子束的散射,会造成信号损失
4、污染样品
取样,戊二醛等固定液固定,酒精梯度脱水,冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥,喷金或蒸碳。以上四个步骤,根据所使用的SEM成像的真空模式,可以有所省略。
如果用ESEM,取样后可直接放入样品室,在一定“环境真空”下进行观察;如果采用LV模式,直到干燥,可以免喷金;高真空模式,必须做到喷金等样品导电处理。
具体可到公益网站:中山大学生物电子显微学实验室网站查询
扫描电镜样品制备: 基础课程,生物样品因含水,其样品制备有其特殊性。
http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5
有时候公益网站有点那个,不好点开,请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/
扫描电镜可以观察生物样品!当前SEM在生物组织形态结构方面研究普遍应用。你向问的问题似乎是:SEM为什么不能观察活的生物样品?
传统扫描电镜工作模式需要将样品处于高真空环境下,因此对样品的基本要求是干燥、无油、导电。
这种条件下,无法满足活生物样观察!但活的生物样品在一定时空下的形态,通过生物组织固定,脱水,干燥,喷金即可观察,可以了解在有生命状态下的组织结构特征。
为了实现活的生物样品观察,美国公司开发的环境扫描电镜已经商品化!
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