在实验室,一般将样品进行液氮冷冻,主要原理和目的是什么?

工业生产中，用压缩液体空气分馏的方法获得液氮，可以用于作为深度制冷剂，由于其化学惰性，可以直接和生物组织接触，立即冷冻而不会破坏生物活性，因此可以用于保存活体组织，生物样品的储存。

所以实验室一般将样品进行液氮冷冻，主要为了生物样品的活性，便于进行实验研究。

液氮研磨后的样品提取酶液成分方法如下：

1、取500ul裂解液，转入1点5离心管中，加入50ul混匀备用。

2、液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有RLT和PLANTaid的离心管，立即用手剧烈振荡20秒，充分裂解。

3、用带钝针头的一次性1ml注射器抽打裂解物10次，直到得到满意匀浆结果，剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。

4、将裂解物13000rpm离心5到10分钟，沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid，将所有裂解物上清转到一个新离心管。

5、较精确估计裂解物(上清)体积，加入0点5体积的无水乙醇，此时出现沉淀，不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。

6、将吸附柱RA放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，除去漂洗液，免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

7、预期RNA产量30ug，加30到50ulRNasefreewater重复，合并两次洗脱液，使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍。

8、洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高，分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15到百分之三十，浓度要低，用户根据需要选择。

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