要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤

要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤,第1张

取样,戊二醛等固定液固定,酒精梯度脱水,冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥,喷金或蒸碳。

以上四个步骤,根据所使用的SEM成像的真空模式,可以有所省略。

如果用ESEM,取样后可直接放入样品室,在一定“环境真空”下进行观察;如果采用LV模式,直到干燥,可以免喷金;高真空模式,必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站:中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程,生物样品因含水,其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个,不好点开,请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

划膜喷金机操作流程 1. 系统参数设置;(有七个参数,其中最后一个参数即厂家参数不需变动)。 1) 设置延迟参数:划膜模式数值表示划线时起步延迟距离,喷金模式表示溶液先出时间延迟, 可设置范围0-50。 2) 设置当前模式:Dis表示当前模式是划膜模式; Spr 表示当前模式是喷金模式; Dot表示当前模式是喷点模式。 3) 泵的选择设置:0表示选择所有泵;9表示选择1、2号泵; 1表示1号泵,以此类推。 4) 泵运行向下的速度: 范围10-40。 5) 重复设置: 划膜、喷金、喷点每次操作是否重复,off表示只执行一次; on表示重 复执行。 6) 等候时间设置: 划膜、喷金模式中,在设置操作重复时,每次完成一个循环后等 候的时间,单位是秒,范围0-999。 2. 位置的调整; 1) 划膜模式中,喷笔提置划膜头上面,按F4键,然后通过高度调节旋钮调整划膜头的 位置; 2) 喷金模式中,喷笔头提置划膜头上面,按F4键,然后调节喷笔的位置(在标注小段 横线位置、喷头距X滑台约1cm左右)。 3) 调整完按F3键。 3. 清洗环节设置; 1) 注射泵往返速度的设置,范围15-40; 2) 注射泵往返次数的设置,一个往返算两次,范围1-99; 3) 注射泵活塞移动方向的设置,up表示开始时向上移动, Down表示开始时向下移动; 4) 清空溶液设置,off表示溶液进出方向从左到右,Up表示溶液加进出方向从右到左。 4. 注射泵的设置; 1) 注射泵阀门的选择,in表示阀门左边打开,out表示阀门右边打开; 2) 注射泵移动速度,范围15-40; 3) 注射泵移动终点位置,范围0-250; 4) 喷笔设置,on表示喷气,off表示喷笔喷气关闭。 注意点: ① 可进行微量溶液的提取。注射泵向上移动,可喷出溶液; 注射泵向下移动,可吸取溶液。 ② 划膜模式溶液的提取,通过划膜头吸取溶液。 喷金模式溶液的提取,通过连接喷笔的一头吸取溶液。 5. 划膜模式参数的设置; 1) 喷量设置,范围0.2-9.9,一般设置为2. 2) X滑台起始点设置,范围0-300.(参考值: ) 3) Y滑台起始点设置,范围0-99.(参考值:) 4) 不同线喷量的设置,off表示每条线喷量相同,on表示划不同喷量的线。 5) 线条长度设置,范围1-350(不能超过350) 文档冲亿季,好礼乐相随mini ipad移动硬盘拍立得百度书包 6) X滑台的速度,范围100-800(10-80mm/s) 7) 修改不同喷量划膜模式的菜单。 8) 两条划线之间的距离可通过旋钮调节。 6. 喷金模式参数的设置; 1) 喷量设置,范围0.6-9.0; 2) X滑台起始点设置,范围0-300(参考值: ); 3) Y 滑台起始点设置,范围0-99(参考值:); 4) 线条间距设置,范围1-350; 5) 线条重复次数设置,范围1-20; 6) X滑台的速度,范围100-999(10-99.9mm/s) 7. 清洗。 8. 清场。 简易步骤: 1. 系统参数设置; 2. 位置调节; 3. 清洗; 4. 注射泵设置; 5. 溶液吸入; 6. 模式参数设置; 7. 运行; 8. 清洗; 9. 清场。

望采纳谢谢


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