要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

划膜喷金机操作流程 1. 系统参数设置；（有七个参数，其中最后一个参数即厂家参数不需变动）。 1） 设置延迟参数：划膜模式数值表示划线时起步延迟距离，喷金模式表示溶液先出时间延迟， 可设置范围0-50。 2） 设置当前模式：Dis表示当前模式是划膜模式； Spr 表示当前模式是喷金模式； Dot表示当前模式是喷点模式。 3） 泵的选择设置：0表示选择所有泵；9表示选择1、2号泵； 1表示1号泵，以此类推。 4） 泵运行向下的速度： 范围10-40。 5） 重复设置： 划膜、喷金、喷点每次操作是否重复，off表示只执行一次； on表示重 复执行。 6） 等候时间设置： 划膜、喷金模式中，在设置操作重复时，每次完成一个循环后等 候的时间，单位是秒，范围0-999。 2. 位置的调整； 1） 划膜模式中，喷笔提置划膜头上面，按F4键，然后通过高度调节旋钮调整划膜头的 位置； 2） 喷金模式中，喷笔头提置划膜头上面，按F4键，然后调节喷笔的位置（在标注小段 横线位置、喷头距X滑台约1cm左右）。 3） 调整完按F3键。 3. 清洗环节设置； 1） 注射泵往返速度的设置，范围15-40； 2） 注射泵往返次数的设置，一个往返算两次，范围1-99； 3） 注射泵活塞移动方向的设置，up表示开始时向上移动， Down表示开始时向下移动； 4） 清空溶液设置，off表示溶液进出方向从左到右，Up表示溶液加进出方向从右到左。 4. 注射泵的设置； 1） 注射泵阀门的选择，in表示阀门左边打开，out表示阀门右边打开； 2） 注射泵移动速度，范围15-40； 3） 注射泵移动终点位置，范围0-250； 4） 喷笔设置，on表示喷气，off表示喷笔喷气关闭。 注意点： ① 可进行微量溶液的提取。注射泵向上移动，可喷出溶液； 注射泵向下移动，可吸取溶液。 ② 划膜模式溶液的提取，通过划膜头吸取溶液。 喷金模式溶液的提取，通过连接喷笔的一头吸取溶液。 5. 划膜模式参数的设置； 1) 喷量设置，范围0.2-9.9，一般设置为2. 2) X滑台起始点设置，范围0-300.（参考值： ） 3) Y滑台起始点设置，范围0-99.（参考值：） 4) 不同线喷量的设置，off表示每条线喷量相同，on表示划不同喷量的线。 5) 线条长度设置，范围1-350（不能超过350） 文档冲亿季，好礼乐相随mini ipad移动硬盘拍立得百度书包 6) X滑台的速度，范围100-800（10-80mm/s） 7) 修改不同喷量划膜模式的菜单。 8) 两条划线之间的距离可通过旋钮调节。 6. 喷金模式参数的设置； 1） 喷量设置，范围0.6-9.0； 2） X滑台起始点设置，范围0-300（参考值： ）； 3） Y 滑台起始点设置，范围0-99（参考值：）； 4） 线条间距设置，范围1-350； 5） 线条重复次数设置，范围1-20； 6） X滑台的速度，范围100-999（10-99.9mm/s） 7. 清洗。 8. 清场。 简易步骤： 1. 系统参数设置； 2. 位置调节； 3. 清洗； 4. 注射泵设置； 5. 溶液吸入； 6. 模式参数设置； 7. 运行； 8. 清洗； 9. 清场。

望采纳谢谢

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