扫描电镜(SEM)一般用来观察组织细胞的表面形貌。
我见过的SEM可以观察到微绒毛、伪足、正在死亡的细胞表面出现的穿孔等结构,可能还有更高级的吧。透射电镜(TEM)可以用来观察细胞内部的细胞器等超微结构。不过我猜想操作技术足够精细到将一个细胞剖开的话,SEM也是可以观察细胞内部的。
扫描电镜的工作原理:
扫描电镜是对样品表面形态进行测试的一种大型仪器。当具有一定能量的入射电子束轰击样品表面时,电子与元素的原子核及外层电子发生单次或多次弹性与非弹性碰撞,一些电子被反射出样品表面,而其余的电子则渗入样品中,逐渐失去其动能,最后停止运动,并被样品吸收。
在此过程中有99%以上的入射电子能量转变成样品热能,而其余约1%的入射电子能量从样品中激发出各种信号。这些信号主要包括二次电子、背散射电子、吸收电子、透射电子、俄歇电子、电子电动势、阴极发光、X射线等。扫描电镜设备就是通过这些信号得到讯息,从而对样品进行分析的。
使用扫描电镜SEM,是细胞形态学研究的主要手段。体视显微镜也可以观测,但放大倍数太低,有效放大几十倍吧,看到细胞应该没有问题,可能影像跟针尖似的,无法看清楚细胞的表面结构,
当前还可以采用激光共聚焦显微镜来观测,分辨率可以达到160nm,有效放大倍数2000倍。通过样品台按照一定步距的升降,每一个步距扫描生成一幅图像。然后把一系列高度的图像在计算机中拟合生成三维形貌。
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