求教,透射电镜观察线粒体

求教,透射电镜观察线粒体,第1张

扫描电镜只能观察放入的样品表面,识别表面信号厚度约为1微米左右,因此用SEM观察必须要线粒体暴露出来。

透射电镜只能观察亚微米级别(<1微米)厚度样品,因此细胞要做切片处理,切出线粒体,或者直接抽提线粒体。

超薄切片:锇酸固定,酒精脱水,甲基丙烯酸甲酯或环氧树脂包埋,最后切片。

冰冻蚀刻术:利用快速冷冻标本,冰刀切割,再铂炭升华。

扩展资料:

电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。

电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍、由照明系统、成像系统、真空系统、记录系统、电源系统5部分构成,如果细分的话:主体部分是电子透镜和显像记录系统,由置于真空中的电子枪、聚光镜、物样室、 物镜、衍射镜、中间镜、 投影镜、荧光屏和照相机。

参考资料来源:百度百科-透射电子显微镜

SEM 固体材料样品制备方便,只要样品尺寸适合,就可以直接放到仪器中去观察。样品直径和厚度一般从几毫米至几厘米,视样品的性质和电镜的样品室空间而定。对于绝缘体或导电性差的材料来说,则需要预先在分析表面上蒸镀一层厚度约10~20 nm的导电层。 否则,在电子束照射到该样品上时,会形成电子堆积,阻挡入射电子束进入和样品内电子射出样品表面。导电层一般是二次电子发射系数比较高的金、银、碳和铝等真空蒸镀层。 在某些情况下扫描电镜也可采用复型样品。SEM样品制备大致步骤: 1. 从大的样品上确定取样部位; 2. 根据需要,确定采用切割还是自由断裂得到表界面; 3. 清洗; 4. 包埋打磨、刻蚀、喷金处理


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