我想知道细胞破碎的方法及各种方法的原理和优缺点?

机械法：主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法，常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。

常用的细胞破碎方法有反复冻融法、超声破碎法、酶处理法、自溶法和表面活性剂处理法 。

细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。实验室对组织细胞的破碎方法很多，有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。

扩展资料：

细胞破碎条件

在破碎前，材料常需要预处理，如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织，脂肪组织和血污等，植物种子需要除壳，微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。

对同一实验材料，由于实验要求不同，采用的破碎方式也存在一定差异，如提取中的核酸和提取其中的核苷酸，前者必须保持十分温和的条件，以保持分子的完整性后者可采用强烈手段。

不同实验规模、不同实验材料和实验要求，使用的破碎方法和条件也不同。一些坚韧组织，如肌肉、植物的根茎等，常需要强烈的搅拌或研磨作用，才能把其组织细胞破坏。而比较柔软的组织如肝、脑等，用普通的玻璃匀浆器即可达到完全破坏细胞的目的。

参考资料来源：百度百科——细胞破碎法

扫描电镜（SEM）一般用来观察组织细胞的表面形貌。

我见过的SEM可以观察到微绒毛、伪足、正在死亡的细胞表面出现的穿孔等结构，可能还有更高级的吧。透射电镜（TEM）可以用来观察细胞内部的细胞器等超微结构。不过我猜想操作技术足够精细到将一个细胞剖开的话，SEM也是可以观察细胞内部的。

扫描电镜的工作原理：

扫描电镜是对样品表面形态进行测试的一种大型仪器。当具有一定能量的入射电子束轰击样品表面时，电子与元素的原子核及外层电子发生单次或多次弹性与非弹性碰撞，一些电子被反射出样品表面，而其余的电子则渗入样品中，逐渐失去其动能，最后停止运动，并被样品吸收。

在此过程中有99%以上的入射电子能量转变成样品热能，而其余约1%的入射电子能量从样品中激发出各种信号。这些信号主要包括二次电子、背散射电子、吸收电子、透射电子、俄歇电子、电子电动势、阴极发光、X射线等。扫描电镜设备就是通过这些信号得到讯息，从而对样品进行分析的。

1、活体染色：即在活细胞状态下进行染色——健那绿（线粒体专一）,染色后还是活的.2、死细胞染色——甲基绿和毗罗红,由于细胞膜有选择透过性,活细胞无法让其进入,只能死了以后再染.3、我猜你问的重点可能就是在有丝分裂观察实验中的试剂：（1）其实醋酸洋红和龙胆紫要先杀死细胞,因为已经进入了细胞核了嘛.（2）实验中先用活细胞是因为要求新鲜且分裂旺盛,经过解离后就死掉了.所以我觉得醋酸洋红和龙胆紫也应该是死细胞染色.

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