怎么看色谱图

怎么看色谱图,第1张

色谱图的横轴是保留时间,单位是分钟min。纵轴是电信号,单位是mAu,或者是mV。

保留时间是定性的参数,也就是说每一个色谱峰代表一个物质,比如上图,有三个色谱峰,这三个峰代表有三个物质。比如物质X在18.278min出峰,那么以后在这个条件下,可以认为在18min左右出峰的就是物质X,也就是定性。

另外纵轴算是定量参数。可以用峰高和峰面积来进行浓度的计算。还是说上图中18.278min出峰的物质X,比如它的峰高大约是48,峰面积是480,那么如果物质X的浓度稀释1倍,它的保留时间不变,但是峰高和峰面积都减少了1倍。峰高大约就是24左右,峰面积240左右。同一个物质,它的浓度和峰面积呈正比关系。

另外还有一些其他的参数可以来看峰型。

比如分离度,分离度大于1.5的情况下两个色谱峰算是完全分离,比如31min和35min的两个色谱峰,应该算是分离了。

比如理论塔板数,理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)。色谱峰肯定是“又高又瘦”会比较好,这样理论板数比较高。如果理论板数太低,色谱峰太宽可能会对积分产生影响。一般规定理论板数最少不得低于2000,新买的色谱柱标定理论板数会在15000+。

直接用透光率T%红外坐标很难看出降解的变化,应该转换为吸光度A%坐标,这样用红外差谱来分析基团的变化,一目了然。

MRI 参考这个 http://wenku.baidu.com/view/f35c5b283169a4517723a302.html

气相液相都是对比标品根据保留时间和峰高或峰面积做积分来定性定量

SEM能谱 是根据图中出现的特征谱线的位置鉴定除H、He以为的所有元素

色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。

高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。

和实验相关的参数:

1、保留时间-也就是可以定性的数据参数

如果使用同样的色谱柱,同样的流动相,分析同样的样品,那么这个样品的保留时间,应该是固定的。不同保留时间的色谱峰,应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱,那么色谱峰越靠后,它对应物质的极性也就越小。

2、峰面积-也就是可以定量的数据参数

这是你在色谱图中可以读出来的参数,在同一个色谱条件下,同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说,如果你配制1.0mg/ml的X物质,进样后峰面积是10000,那么,你配制0.5mg/ml的X物质,进样后峰面积差不多就是5000

3、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件

同一样品,同一方法,同一色谱柱,在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。


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