要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

是透射型电子显微镜！

透射电镜是通过透射过样本和放大产生的电子束，投射到照相胶片或在荧光屏观察聚焦的物体的图像。的0.10.2nm的透射电子显微镜的分辨率，在数万的倍率至几十倍。由于电子散射或容易被物体吸收，所以低渗透，必须制备超薄切片较薄（通常为50100nm的）。制备过程类似于石蜡切片，但需要非常严格的。为了赶上了几分钟后，引起了身体的亡，组织块要小（小于1立方毫米），常用戊二醛和饿了双固定酸树脂包埋，切成薄片继发特殊的超薄机（超微）电子切片，然后用乙酸双氧铀和柠檬酸铅染色

电子扫描型电子显微镜的电子束扫描在样品表面微细，得到的集合与一个特殊的检测器，一个电信号被形成输送到阴极在屏幕上射线管显示对象。三维构象（细胞，组织）的表面，照片可以生产。 SEM样品用戊二醛固定和饿酸，脱水和临界点干燥，然后喷涂一薄层的金的试样膜的表面上之后，为了增加在两波的电子的数量。扫描型电子显微镜来观察较大的组织的表面上的结构，因为场深度长，1毫米可以清楚的图像的不平坦表面，这样就把样品富有立体感的图像。

做电镜固定，25%戊二醛怎么稀释到2.5

透射电镜物品制备步骤

物品, 透射电镜, 制备步骤

．取材：

组织块于1立毫米

二．固定：

2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间

用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三

1%锇酸固定液固定2-3

用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15 三

三．脱水：

50%乙醇15-20

70%乙醇15-20

90%乙醇15-20

90%乙醇 90%丙酮（1：1）15-20

90%丙酮15-20

4度冰箱内进行

100%丙酮 室温 15-20三

四．包埋：

纯丙酮+包埋液（2：1）室温 3-4

纯丙酮+包埋液（1：2）室温 夜

纯包埋液 37度 2-3

五．固化：

37度烘箱内 夜

45度烘箱内 12

60度烘箱内 24

六．超薄切片机切片 50-60 nm

七．3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色

八．透射电镜观察拍片

由于物品含水太电镜真空蒸发掉破坏结构所需要些能够水温取代掉、并且自身没结构物质树脂包埋剂物脆弱、结构容易破坏所才需要温制才复杂物电镜制主要工作看电镜倒要物品超薄切片流程图：

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