要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

冻干粉

是在无菌环境下将药液冷冻成固态,抽真空将水分升华干燥而成的无菌粉注射剂。

对于干燥热敏性制品和需要保持生物活性的物质，冻干是一种有效的方法。此法是将需要干燥的制品在低温下使其所含的水分冻结，然后放在真空的环境下干燥，让水分由固体状态直接升华为水蒸气并从制品中排除而使制品活动干燥。该方法有效地防止了制品理化及生物特性的改变，对

生物组织

和

细胞结构

和特征的损伤较小，使其快速进入休眠状态，有效保护了许多热敏性药物生物制品有效成份的稳定性。如蛋白质、微生物类不会发生变性和丢失其生物活性；其次，冻干制品在干燥后形态疏松、颜色基本不发生改变，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性。第三，由于干燥在真空条件下进行，对于一些易氧化的物质具有很好的保护作用。第四，制品经过冻干后水份含量非常低，使制品的稳定性提高，受污染的机会减小，这不仅方便了运输还延长了制品保存期限

关于EGF冻干粉

EGF最大的问题就是其活性不易保持，早先是在

医药行业

应用，保存的形式是瓶装的冻干粉，在冷冻的条件下可以长期保存。但是EGF是水溶性的，只能溶于水才能涂抹在肌肤上发挥作用，但是冻干粉一旦配成水溶液，其活性就会逐渐丧失，一般为5天，到了第七天，就全部消失了。

化妆品行业要求商品在流通环节必须保持一年的有效期，因此有些化妆品公司只能参照医药行业的办法，以一瓶EGF冻干粉配一瓶

溶媒

，要求消费者随配随用，配好5-7天内必须用完。

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