生物标本
制备过程⑴取材⑵固定:保持细胞内部结构不改变。(
戊二醛
:在蛋白质分子之间形成
共价
键,
将它们交联在一起。
四氧化锇
:除与蛋白共价结合外,还对脂类有良好的固定效果。)脱水:标本必须置于
高真空
中进行电镜观察,所以电镜生物标本不能含水。梯度乙醇。包埋:
为使柔软
生物组织
制成
超薄切片
(良好支撑),并使切片耐受高真空、电子轰击,应在切片前将标本进行包埋,常用环氧树脂。切片:电子穿透力很弱,需将样品制成40~50nm厚薄片。约为细胞的1/200厚度。染色:
生物分子
由
原子序数
低的轻元素组成,它们散射电子能力弱,在电镜下几乎不存在明暗反差,需加大生物样品反差,进行染色。重金属浸染。
(透射电镜样品提高反差的方法:⑴
负染
法⑵
冰冻蚀刻
)
扫描电子显微镜
标本制备:取材、清洗、
固定、干燥、镀膜
因为电镜观察所制备的的标本都是将细胞脱水后的死标本,所以不能观察活性标本~
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