牛流行热如何进行电子显微镜检查?

牛流行热进行电子显微镜检查的方法：

1、负性染色法

将受检样品（病毒细胞培养物冻融后的离心上清液）悬浮液一滴（约20μl）滴于蜡盘上。将被覆Formvar膜的铜网，膜面朝下放到液滴上，吸附2～3min。取下铜网，用滤纸吸掉多余的液体。再将该铜网放到PH7、02%磷钨酸染色液上染色1～2min，取下铜网，用滤纸吸掉多余染色液，干燥后，放入电镜进行检查。

2、超薄切片法

将样品（刮下病毒培养小瓶的细胞经离心取其沉淀物）放入4%戊二醇中固定2～4h，用磷酸缓冲液漂洗后，再经1%四氧化锇固定1～2h。脱水：经50%—70%—80%—95%—100%乙醇逐级脱水，其中100%乙醇脱水3次，环氧丙烷过渡2次。包埋：脱过水的样品放入制备好的包埋剂中（主要成分为EPON812h聚合：样品在包埋剂中经32℃浸透过夜，再经70℃聚合96h。切片：将聚合好的组织块放超薄切片机上进行切片。染色：切片经酯酸铀和柠檬酸铝双重染色。然后进行电镜检查。

3、结果

经电镜检查，无论是负性染色，还是超薄切片检查，若为阳性均应出现典型的子弹状或锥形的病毒粒子。

sem 有冷场发射的和热场发射的，还有环扫。场发射的分辨率较高，达到1nm

环扫达3¬4nm,样品室比较大，景深大，可做断口和有污染的样品，电子束流达，可信度高。

还有什么不懂的的话，可以和我交流，大家共同进步。

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