扫描电子显微镜能看见基因有什么办法能看见人的基因

扫描电子显微镜能看见基因有什么办法能看见人的基因,第1张

基因是看不见的,一般把dna切断成大小不同的片段,将这些小片段纯化出来,通过化学方法将这些小片段分解为单个核苷酸,利用水解顺序推断基因序列.

扫描电镜(SEM)是介于透射电镜和光学显微镜之间的一种微观形貌观察手段,可直接利用样品表面材料的物质性能进行微观成像。扫描电镜的优点是,①有较高的放大倍数,20-20万倍之间连续可调;②有很大的景深,视野大,成像富有立体感,可直接观察各种试样凹凸不平表面的细微结构;③试样制备简单。 目前的扫描电镜都配有X射线能谱仪装置,这样可以同时进行显微组织形貌的观察和微区成分分析,因此它是当今十分有用的科学研究仪器。

可以。DNA的碱基在260nm处有吸收。用紫外分光光度计测260nm处DNA分子的OD值,就能通过朗伯-比尔定律OD=εlc换算出浓度。式子里l是吸收光路的长度;c是浓度,单位一般用μg/ml;ε是吸光系数,双链DNA一般取0.02ml/(μg·cm),单链DNA因为增色效应,ε要大一些,取0.05ml/(μg·cm)。

如果知道一个DNA片段的碱基数,还可以换算出DNA片段的物质的量浓度。

DNA检测技术有很多,主要分为定性和定量方法。

给你举几个:

1,分子杂交技术,(包括southern杂交,northern杂交,基因芯片等)

分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测变性而且固定在硝酸纤维素膜上的宿主细胞DNA。这些探针可以不依赖宿主细胞DNA来制备,例如用随机引物制备探针。探针上标记酶﹑生物素﹑放射性同位素﹑地高辛(Dig)等。由于地高辛标记核酸探针,操作方便、灵敏度高,已标记的探针在4℃贮存可达两年之久,方便随时应用,所以现在常采用地高辛标记核酸探针,用光标记法将光敏Dig标记到探针上,制成光敏-Dig-核酸探针,再与固定在硝酸膜上的靶核酸进行靶DNA分子杂交,使之与抗Dig-碱性磷酸酶结合,最后可用不同的检测方式进行检测,发光检测和显色检测均可,灵敏度可达10pg以下

2,基于DNA结合蛋白的方法

Threshold® Immunoassay分析系统是基于两种DNA序列非特异性蛋白,单链DNA(ssDNA)结合蛋白(SSB)和抗ssDNA 的单抗。检测的基本过程是当生物素—DNA单链结合蛋白和尿素酶—抗ssDNA 的单抗与变性的宿主细胞DNA结合最终形成复合物,通过亲合素将此复合物连接到生物素—硝酸纤维素膜,在通过洗涤所有非特异性的被洗脱掉,最后放于有尿素溶液的读数仪,尿素酶催化尿素分解成NH3和CO2 导致PH值发生变化,读数仪根据PH值的变化换算成DNA的量,从而达到检测残余DNA含量的目的。

3,PCR法,其中以实时定量PCR法最为突出

荧光定量PCR是基于PCR扩增时,在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,产物的增加可以通过荧光信号指示,通过实时监控PCR体系中的荧光信号,对样本中初始模板进行定量分析。定量PCR可实时检测产物量,通过加入已知浓度的标准样品绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度,从而达到检测残余DNA含量的目的。

此外,对DNA的定量技术也有很多,可以看下这篇文章《核酸定量技术及其在生物检测中的应用》


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