扫描电镜只能成黑白的图像么？为什么？ 彩色的都是后期处理的吧

是的。

扫描电镜（扫描电子显微镜SEM），其电子枪发射出的电子束被磁透镜汇聚成极细的电子“探针”，在样品表面进行扫描，电子束可激发样品表面放出二次电子，二次电子产生的多少与样品表面的形貌有关。二次电子由探测器收集，并在那里被闪烁器转变成光信号，再经光电倍增管和放大器又转变成电压信号来控制荧光屏上的电子束强度。

这样，样品不同部位上产生二次电子或多或少的差异，直接反映在荧光屏相应部位形成或亮或暗的差别，从而得到一幅放大的立体感很强的图像。

也就是说只能形成黑白图像！

调整样品台倾斜角度！一种所谓机械对中样品台在这个调解过程中，虽然不能精确的保证样品倾斜时严格以同一个轴线来调整，但基本观察视野不会跑，不离焦！这样翻过来调过去的看，你就看清楚了！

稍微多讲点有关EM立体成像技术：

1950年代，美国科学家在实验室，第一次使用SEM弄出了立体对，那时SEM还没有商品化！在一般摄影上被称作全息照相！

现在FEI公司有这样的选购软件，可以用在SEM或TEM上。自动控制样品台按照一定角度间隔倾斜，且保证倾斜同轴，每个角度保存一幅图像，然后把N个图像合成一个立体图像，是最为精准的技术。SEM形成表面立体形貌像，TEM的立体像和CT效果相同。由于要求样品台精度极高，且运算复杂，价格贼贵！

为了简化操作，节约成本，只看个大概！最常用的立体对方法是样品角度不变，电子束以一定允许的夹角从两个方向分别扫描一张图像，一张红色伪彩，一张绿色伪彩。把两张照片叠加，形成红绿重影像！然后戴个红绿镜片眼镜，也可看到立体图像,解决你的问题！

除了立体对技术，还有就是线扫描Y增益的示波器技术！

有些扫描电镜带有示波器，扫描发生器让电子束在划定的直线上扫描，然后把信号曲线画在直线上方，因为图像信号强度是电子束与像素表面角度的函数，一般认为曲线的高低起伏代表样品的高低起伏。如果将一帧图像均做Y增益，即可用软件合成一幅立体表面形貌像。有些厂商忽悠客户说此为表面立体像，其实很不严谨，因为很多时候会有假象存在,基本上没有实用价值，很多厂商取消了这个功能！

如果没有做以上的多角度观察，那就要考验成像信号的判断。就这张图像而言，可以肯定：金字塔在基底上凸起！棱角凸起信号强度高，发亮；凹陷信号强度低，发暗！

观察细胞在材料表面形貌时，用什么染料对细胞染色啊？ 我就是想在普通光镜下观察一下细胞在材料表面的形态，所以想问下这时用什么染料，谢谢大家。zshaop(站内联系TA)如果你的样品是透明的，就不用颜色．．如果不太透明，最好用ＳＥＭ，染色还不如看ＳＥＭcaojun2318(站内联系TA)可以用细胞膜荧光染料，能看见细胞在培养板上的贴壁的形貌dj04164(站内联系TA)最好先固定，样品如果不透明又要光镜看，那就肽酚蓝，考马斯亮蓝，结晶紫，然后拿晶向显微镜看看。透明的话一般的光镜就行了。诺曼底1227(站内联系TA)FITC-鬼笔环肽，用共聚焦显微镜观察，可以看清楚细胞骨架，对于分析细胞在材料表面的形貌还是挺好的。骄阳2007(站内联系TA)FITC-鬼笔环肽是什么，为什么叫鬼笔？

:rol:jingwang7793(站内联系TA)用共聚焦显微镜观察,细胞核和细胞质因染色不同,色彩特别好看. 具体方法要查文献.诺曼底1227(站内联系TA)这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

第一次听说，学习啦，呵呵。效果图能否传上来看看~~诺曼底1227(站内联系TA)效果图你可以在biomaterials上搜一下，一般发在那上面的文章都有用这种图的，当然FITC只是其中一种染料，还有其他的荧光染料可以用的，像罗丹明，calcein-AM and ethidium homodimer-1,这些都有人做，而且效果不错

这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

phalloidin：由鬼笔鹅膏真菌（Amanita phalloides）产生的一种环肽。可与F肌动蛋白结合，使F肌动蛋白保持稳定。其荧光标记物是鉴定F肌动蛋白的重要试剂。

dj04164(站内联系TA)呵呵，怎么还有人不明白，invetrogen F432，给个效果图， 自己查。绿的是网上找的，红的是我照的。都是伪彩。鬼笔是一种真菌（蘑菇），鬼笔环肽，一种剧毒生物碱，抑制微丝去组装，与CB作用正好相反，与结合微丝，当用FITC标记鬼笔环肽之后可以用它标记细胞微丝（f actin）再不明白的，过来我学校教你。

能看到染色后的荧光情况

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