要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤

要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤,第1张

取样,戊二醛等固定液固定,酒精梯度脱水,冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥,喷金或蒸碳。

以上四个步骤,根据所使用的SEM成像的真空模式,可以有所省略。

如果用ESEM,取样后可直接放入样品室,在一定“环境真空”下进行观察;如果采用LV模式,直到干燥,可以免喷金;高真空模式,必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站:中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程,生物样品因含水,其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个,不好点开,请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

楼主如果基体必须是不导电玻璃,如不能喷金,可以喷碳,这可以消除荷电问题,不妨碍形貌观察。如果不能喷涂导电膜,就得升级您使用的仪器:使用具有更高的低电压性能扫描电镜,玻璃水平放置,低电压在1kv-2kv之间找到合适的消除荷电的观察条件,或者玻璃片大角度倾斜消除荷电,提高加速电压获得更好的分辨率;可以选择低真空观察模式。

如果能喷金,显然是喷金后图像质量更好,只有实在不能喷金的样品,例如不能干燥的样品或者是结构尺寸太小(一般小于5nm)的样品,或者要做能谱之类的分析,才考虑不喷金做电镜。

做低真空SEM跟钨灯丝SEM的成本比起来差好几倍甚至十几倍,要比较他们的性能也太不公平了。

钨灯丝电镜如果喷金后观察大约可以有效放大到两万倍以上。低真空电镜虽然标称的分辨能力要强很多,用标准样品的话,上到几十万倍都有可能。但是实际情况受样品的影响很大,能放到多少倍很难说,不一定能比喷金后用钨灯丝电镜看得好。


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