细菌做生物扫描电镜前怎么洗涤

细菌做生物扫描电镜前怎么洗涤,第1张

1样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜,然后按下列步骤处理样品:

2倒掉固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;

3用1%的锇酸溶液固定样品1-2h;

4倒掉固定液,用0.1M,pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次,每次15min;

5用梯度浓度(包括50%,70%,80%,90%和95%五种浓度)的乙醇溶液对样品进行脱水处理,每种浓度处理15min,再用100%的乙醇处理一次,每次20min;最后过度到纯丙酮处理20min。

扫描电镜成像原理主要有两种,二次电子像(secondary electron):形貌衬度,就是你的细菌外表有凸凹形貌,可以拍摄形貌像;背散射电子探头(back scatter electron):原子序数衬度,你可以进行染色,把一些重金属的盐类设法溶进细菌体内,然后用BSE观察时,细菌就是白亮的。

具体不懂的可以联系我,希望对你有帮助。


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