测量是出现负值,说明空白溶液的吸光度大于样品液,这时得检查在供试液制备过程中是否出现差错;
应该检查一下空的比色皿是否配对完好,如果几个比色皿之间习惯度差异比较大也可能造成上述现象;
也有可能仪器坏了,用以前测试过的质粒做对照,再测一次,或者拿你现在测的样品去别的机子上测.
PH值有时也会影响测试结果,如果你是用ddH2O溶解的,建议用TE溶解再测一次看看。浓度确实很低,已经达到仪器检测的下限,此时出现什么结果应该都不奇怪了。
用可见分光光度计测吸光度时出现负值的原因很可能是进行了错误的操作方法,或是顺序错误,或是操作错误,或是器皿不够干净等等,都会造成出现负值的后果。
用可见分光光度计测吸光度实验时候必须注意的几点:
1、首先要严格按照实验步骤来,不得少做或者漏做,更不可以打乱顺序做,这样肯定得不好的实验结果的。
2、用于实验的比色皿必须配套使用,这个必须遵守,也许外观看起来都差不多,但是其实配套很重要,无论玻璃比色皿还是石英比色皿,不能混用。
3、必须要保持比色皿的洁净,在每次实验后,一定要清理实验器具,并且在实验过程中,不要用手直接触摸比色皿的透光面,因为这些小动作,往往都会造成实验效果的不好。
4、在放置实验器具的时候,特别是比色皿放置方向,要严格按照实验步骤来放,如果方向错了,那么实验肯定成功不了,所以,比色皿的方向是否正确很重要。
5、在实验过程中,还要时刻关注,拉杆是否到位。
有可能是你们的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰
流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.
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