要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

1、透射电子显微镜电子束的波长要比可见光和紫外光短得多，并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比，也就是说电压越高波长越短。

透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收，故穿透力低，样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量，必须制备更薄的超薄切片，通常为50～100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。

常用的方法有：超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品，通常是挂预处理过的铜网上进行观察。

2、扫描电镜的特点：有较高的放大倍数，2-20万倍之间连续可调；有很大的景深，视野大，成像富有立体感，可直接观察各种试样凹凸不平表面的细微结构；试样制备简单。

生物：种子、花粉、细菌；

医学：血球、病毒；

动物：大肠、绒毛、细胞、纤维；

材料：陶瓷、高分子、粉末、金属、金属夹杂物、环氧树脂；

化学、物理、地质、冶金、矿物、污泥（杆菌）、机械、电机及导电性样品，如半导体(IC、线宽量测、断面、结构观察）电子材料等。

扩展资料

透射电镜的总体工作原理是：由电子枪发射出来的电子束，在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜，通过聚光镜将之会聚成一束尖细、明亮而又均匀的光斑，照射在样品室内的样品上；透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息，样品内致密处透过的电子量少，稀疏处透过的电子量多；

经过物镜的会聚调焦和初级放大后，电子束进入下级的中间透镜和第1、第2投影镜进行综合放大成像，最终被放大了的电子影像投射在观察室内的荧光屏板上；荧光屏将电子影像转化为可见光影像以供使用者观察。

扫描电子显微镜的制造依据是电子与物质的相互作用。扫描电镜从原理上讲就是利用聚焦得非常细的高能电子束在试样上扫描，激发出各种物理信息。通过对这些信息的接收、放大和显示成像，获得测试试样表面形貌的观察。

参考资料来源：百度百科-扫描电子显微镜

参考资料来源：百度百科-透射电子显微镜

观察细胞在材料表面形貌时，用什么染料对细胞染色啊？ 我就是想在普通光镜下观察一下细胞在材料表面的形态，所以想问下这时用什么染料，谢谢大家。zshaop(站内联系TA)如果你的样品是透明的，就不用颜色．．如果不太透明，最好用ＳＥＭ，染色还不如看ＳＥＭcaojun2318(站内联系TA)可以用细胞膜荧光染料，能看见细胞在培养板上的贴壁的形貌dj04164(站内联系TA)最好先固定，样品如果不透明又要光镜看，那就肽酚蓝，考马斯亮蓝，结晶紫，然后拿晶向显微镜看看。透明的话一般的光镜就行了。诺曼底1227(站内联系TA)FITC-鬼笔环肽，用共聚焦显微镜观察，可以看清楚细胞骨架，对于分析细胞在材料表面的形貌还是挺好的。骄阳2007(站内联系TA)FITC-鬼笔环肽是什么，为什么叫鬼笔？

:rol:jingwang7793(站内联系TA)用共聚焦显微镜观察,细胞核和细胞质因染色不同,色彩特别好看. 具体方法要查文献.诺曼底1227(站内联系TA)这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

第一次听说，学习啦，呵呵。效果图能否传上来看看~~诺曼底1227(站内联系TA)效果图你可以在biomaterials上搜一下，一般发在那上面的文章都有用这种图的，当然FITC只是其中一种染料，还有其他的荧光染料可以用的，像罗丹明，calcein-AM and ethidium homodimer-1,这些都有人做，而且效果不错

这是一种荧光染料，就是用鬼笔环肽修饰的FITC，我有同学做过这个，做出来的效果图很漂亮

phalloidin：由鬼笔鹅膏真菌（Amanita phalloides）产生的一种环肽。可与F肌动蛋白结合，使F肌动蛋白保持稳定。其荧光标记物是鉴定F肌动蛋白的重要试剂。

dj04164(站内联系TA)呵呵，怎么还有人不明白，invetrogen F432，给个效果图， 自己查。绿的是网上找的，红的是我照的。都是伪彩。鬼笔是一种真菌（蘑菇），鬼笔环肽，一种剧毒生物碱，抑制微丝去组装，与CB作用正好相反，与结合微丝，当用FITC标记鬼笔环肽之后可以用它标记细胞微丝（f actin）再不明白的，过来我学校教你。

能看到染色后的荧光情况

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