要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤

要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤,第1张

取样,戊二醛等固定液固定,酒精梯度脱水,冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥,喷金或蒸碳。

以上四个步骤,根据所使用的SEM成像的真空模式,可以有所省略。

如果用ESEM,取样后可直接放入样品室,在一定“环境真空”下进行观察;如果采用LV模式,直到干燥,可以免喷金;高真空模式,必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站:中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程,生物样品因含水,其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个,不好点开,请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

梯度酒精脱水,酒精从低浓度到高浓度就可以脱水,比如70%-80%-90%-95%-100%,将要脱水的东西依次放入上述梯度酒精中,每个2-5分钟。如果感觉脱水不彻底可以在后面多几次无水乙醇脱水。

不知道你的标本是什么,我观察的是细菌生物膜,脱水的酒精梯度是30%、50%、75%、90%、99%、100%,100%(也就是无水酒精)脱水两次,每个梯度间隔15分钟。希望对你有帮助。


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