生物组织扫描电镜实验的前期处理有哪些步骤

生物组织扫描电镜实验的前期处理有哪些步骤

1．实验方法

实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在.现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下：

(1)化学物质的检测方法：

①淀粉——碘液

②还原糖——斐林试剂、班氏试剂

③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂

④乳酸——pH。

采用低速离心（细胞离下来的转数即可，如1000rpm-1500rpm），然后将沉淀转入2.5-4%的戊二醛中固定（2h以上，可于4度放至几天），然后再次离心，用丙酮逐级脱水（30%，50%，70%，80%，90%，100%，100%）再用叔丁醇置换，然后真空冷冻干燥，接下来将细胞粉（抽干应呈现为粉末状）涂抹在导电胶上，再将导电胶粘放到样品台上进行喷金处理，处理好的样品就可以放入扫描电镜样品室进行观察拍照了。

一般要在测定之前进行样品的前处理，即进行分离、纯化、浓集，必要时还需对待测组分进行化学衍生化，从而为测定创造良好的条件。

生物样品进行前处理的目的在于：

1．物进入体内后，经吸收、分布代谢，然后排出体外。在体液、组织和排泄物中除了游离型（原型）物之外，还有物的代谢物、物与蛋白质形成的结合物、以及物或其代谢物与内源性物质，如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸甙（glucuronides）、硫酸酯（sulphates）缀合物等多种形式存在，需要分离后测定物及代谢物；

2．生物样品的介质组成比较复杂。如在血清中既含有高分子的蛋白质和低分子的糖、、尿素等有机化合物，也含有Na＋、K＋、X-等无机化合物］。其中影响最大的是蛋白质，若用HPLC法测定物浓度时，蛋白质会沉积在色谱柱上发生堵塞，严重影响分离效果。因此，为了保护仪器，提高测定的灵敏度，必须进行除蛋白等前处理

在物分析中，考察一个分析方法的选择性时，应着重考虑杂质、降解产物、相关化合物以及制剂辅料等其他组分是否对被测物的测定有干扰。一般，通过添加上述物质的样品与未曾添加的样品所得分析结果进行比较而确定

由于比表面积的测定与颗粒的外表面密切相关,且吸附法测定的关键是吸附质气体分子“有效地”吸附在被测颗粒的表面或填充在孔隙中,因此样品颗粒表面的是否“洁净”至关重要.样品处理的目的主要是让被非吸附质分子占据的表面尽可能地被释放出来,以便测试过程中有利于吸附质分子的表面吸附,一般的样品测定前都需进行预处理,处理的方法依测定的样品特性进行选择.一般情况下,大多数样品需要去除的是其表面吸附的水分子,因此高于100℃（一般取105℃-120℃）常压下的烘干即可达到此目的

---