sem前处理脱水目的

sem前处理脱水目的：脱水至无水状态，为减缓其挥发速度，退回至85%脱水剂，取出，空气中自然干燥。

优点：脱水剂为低表面张力物质，挥发过程中减少了样品的收缩及损伤

缺点：常常使样品发生变形收缩

适用范围：铸型或体表比较坚硬的甲壳昆虫等含水量较少的样品

扫描电镜成像原理主要有两种，二次电子像(secondary electron)：形貌衬度，就是你的细菌外表有凸凹形貌，可以拍摄形貌像；背散射电子探头(back scatter electron)：原子序数衬度，你可以进行染色，把一些重金属的盐类设法溶进细菌体内，然后用BSE观察时，细菌就是白亮的。

具体不懂的可以联系我，希望对你有帮助。

1样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜，然后按下列步骤处理样品：

2倒掉固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；

3用1%的锇酸溶液固定样品1-2h；

4倒掉固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；

5用梯度浓度（包括50%，70%，80%，90%和95%五种浓度）的乙醇溶液对样品进行脱水处理，每种浓度处理15min，再用100%的乙醇处理一次，每次20min；最后过度到纯丙酮处理20min。

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