电泳条带为什么有宽有窄，有浓有淡

条带过宽或者不清晰是因为DNA被降解了或者是凝胶没做好。

sds-page电泳泳道一般不会很宽的，因为用来形成泳道的梳子都是固定大小的，只有电泳时条带可能会变的很宽这个是因为上样体积比较大的时候，比如上满整个泳道的时候，因为浓缩胶体积小，未能将样品完全压成一条线，在分离胶的时候条带就容易扩散。

扩展资料：

注意事项：

样品和缓冲离子扩散速度增加，引起样品分离带的加宽。

产生对流，引起待分离物的混合。

如果样品对热敏感，会引起蛋白变性。

引起介质粘度降低、电阻下降等等。电泳中产生的热通常是由中心向外周散发的，所以介质中心温度一般要高于外周，尤其是管状电泳，由此引起中央部分介质相对于外周部分粘度下降，摩擦系数减小，电泳迁移速度增大，由于中央部分的电泳速度比边缘快，所以电泳分离带通常呈弓型。

参考资料来源：百度百科-电泳条带

酶切产物电泳图长条带和半圆形条带的区别：含义不同，性质不同。

1、性质不同：如果是单酶切，超螺旋质粒会变成开链DNA，开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒，因此条带会偏大，这是酶切充分的情况。如果不充分，就会有大小有差距的几条带；如果是双酶切，而且片段大小适中，可以看见酶切的片段和载体，还有未切开的质粒。

2、含义不同：能不能区分超螺旋质粒和开链质粒，和所用琼脂糖凝胶的浓度，电泳时间，DNA纯度有关。试着延长跑胶的时间，应当是有区别的。酶切之前就有几条带，可能是因为质粒样品中有杂带，来源于杂菌或者降解。

DNA的限制性内切酶酶切分析

限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA，而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然后从底物上解离。

凝胶电泳中条带的位置与电泳速度有关，宽度与样品的不均一性有关和颜色深浅与含量高低有关。

带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。

常用凝胶电泳分类：

（1）琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的电泳介质 , 其密度是由琼脂糖的浓度决定的。

经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化, 可用于DNA片段的制备电泳。

（2）聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链 D N A 片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 D N A 的缺点是 D N A 的迁移 率受碱基组成和序列的影响。

由于无法得知未知 D N A 的迁移是 否反 常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链 D N A 的大小。二是用于分离及纯化单链 D N A 片 段的变性聚丙烯酰胺凝胶。

这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。

---