各位大神求教:生物化学上的质谱法推导核酸,要过程的啊!!!

各位大神求教:生物化学上的质谱法推导核酸,要过程的啊!!!,第1张

这其实你不用要什么过程什么的,只要知道原理,质谱结果软件会帮你出的,你只需要只要原理,去怎么分析结果就OK了!

质谱是纯物质鉴定的最有力工具之一,其中包括相对分子量测定、化学式确定及结构鉴定等。

一、相对分子质量的测定

利用质谱图上分子离子峰的m/z可以准确的确定该化合物的相对分子质量。一般说来,除同位素峰外,分子离子峰一定是质谱图上质量数最大的峰,它应该位于质谱图的最右端。但是,由于有些化合物的分子离子峰稳定性较差,分子离子峰很弱或不存在,给正确识别分子离子峰带来困难。因此,在判断分子离子峰时应注意以下问题。

(一)分子离子稳定性的一般规律

分子离子的稳定性与分子结构有关。碳数较多,碳链较长(有例外)和有支链的分子,分裂几率较高,其分子离子峰的稳定性较低;具有π键的芳香族化合物和共轭。

( 二)分子离子峰必须符合氮规律

在只含有C、H、O、N的化合物中,含有偶数个(包括零)氮组成的化合物,其相对分子质量必为偶数;含有奇数个氮原子的化合物的相对分子量为奇数。这是因为在由C、H、O、N、S、P卤素等元素组成的化合物中,只有氮原子的化合价为奇数而质量数为偶数。这个规律称为"氮律"。不符合"氮律"的离子峰一定不是分子离子峰。

(三)利用碎片峰的合理性判断分子离子峰

在离子源中,化合物分子电离后,分子离子可以裂解出游离基或中性分子等碎片。若裂解出一个•H或•CH3、H2O、C2H4碎片,对应的碎片峰为M-1、M-15、M-18、M-28等,这叫做存在合理的碎片峰。若出现M-3至M-14,M-21至M-25范围内的碎片峰,称为不合理碎片峰,则说明分子离子峰的判断有错。表明试样中可能存在杂质或者把碎片峰错误判断为分子离子峰。表7-2中列出从分子离子中裂解的常见碎片。

表7-2 从分子离子中裂解的常见碎片

(四)利用同位素峰识别分子离子峰

有些元素如35Cl、79Br、32S的同位素37Cl、81Br、34S相对丰度较大,其M+2同位素峰十分明显,通过M、M+2等质谱峰来推断分子离子峰,若分子中含一个氯原子时,M峰与M+2峰的强度比为3:1;若分子中含一个溴原子时M峰与M+2峰强度比为1:1,这是因为M峰与M+2同位素峰强度比与分子中同位素种类、丰度有关。总之,同位素离子峰的信息有助于分子离子峰的正确判断。

(五)由分子离子峰强度变化判断分子离子峰

在电子轰击离子源(EI)中,适当降低电子轰击电压,分子离子裂解减少、碎片离子减少,则分子离子峰的强度应该增加;在上述措施下,若峰强度不增加,说明不是分子离子峰。逐步降低电子轰击电压,仔细观察m/z最大峰是否在所有离子峰中子后消失,若最后消失即为分子离子峰。

这是其中一部分,想要学习可以借写着方面的书,仔细看看,其实很简单。

气质图显示所有的碎片峰操作:先找到分子离子峰(一般为质荷比最大的质谱峰),再结合其同位素峰及碎片峰证和推断的经质量分开后,到被并记录下来,经处理后以质谱图的形式表示出来图中,表示离子的质荷比(m/z)值,从左到右质荷比的值增大,对于带有单电荷的离子,横坐标表示的数值即为离子的;表示离子流的,通常用来表示,即把最强的离子流强度定为100%,其它离子流的强度以其表示,有时也以所有被记录离子的总离子流强度作为100%,各种离子以其所占的百分数来表示


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