电子显微镜为什么不能观察活性标本呢？

答：透射电镜生物标本制备过程⑴取材⑵固定:保持细胞内部结构不改变。（戊二醛：在蛋白质分子之间形成共价键, 将它们交联在一起。四氧化锇：除与蛋白共价结合外,还对脂类有良好的固定效果。）脱水：标本必须置于高真空中进行电镜观察,所以电镜生物标本不能含水。梯度乙醇。包埋: 为使柔软生物组织制成超薄切片（良好支撑）,并使切片耐受高真空、电子轰击，应在切片前将标本进行包埋,常用环氧树脂。切片:电子穿透力很弱,需将样品制成40～50nm厚薄片。约为细胞的1/200厚度。染色:生物分子由原子序数低的轻元素组成，它们散射电子能力弱,在电镜下几乎不存在明暗反差,需加大生物样品反差,进行染色。重金属浸染。

(透射电镜样品提高反差的方法:⑴负染法⑵ 冰冻蚀刻)扫描电子显微镜标本制备：取材、清洗、 固定、干燥、镀膜因为电镜观察所制备的的标本都是将细胞脱水后的死标本，所以不能观察活性标本~

扫描电镜（SEM）一般用来观察组织细胞的表面形貌，我见过的SEM可以观察到微绒毛、伪足、正在死亡的细胞表面出现的穿孔等结构，可能还有更高级的吧。透射电镜（TEM）可以用来观察细胞内部的细胞器等超微结构。不过我猜想操作技术足够精细到将一个细胞剖开的话，SEM也是可以观察细胞内部的。

SEM，TEM，AFM检测生物样品都有什么不足

透射电镜（TEM）的放大倍数要比扫描电镜（SEM）的高,当然两则的成像原理也是不同的,如果需要观察纳米颗粒在聚合物中的分散情况,你就必须要用TEM来观察了,SEM通常看材料的缺口断面,当然还有许多其他应用.\x0dSEM是电子束激发出表面次级电子,而TEM是穿透试样,而电子束穿透能力很弱,所以TEM样品要求很薄,只有几十nm, TEM一般放大能达几百w倍,而SEM只有几万倍.\x0d扫描电镜通常用在一些断口观察分析,外加一个能谱仪,可以进行能谱扫描.其放大倍数相对较低,操作方便,样品制作简单,对于高聚物,须进行喷金处理 TEM则可以观看样品的内部结构,粒子的分散等.其放大倍数高于SEM,但也不是绝对,现在有些扫描电镜的放大倍数也可以很高.其操作较复杂,样品制作也较为烦琐

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