要对细菌做SEM，前处理是什么？需要把细菌弄成干态或者固定是吗？求详细的步骤

取样，戊二醛等固定液固定，酒精梯度脱水，冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥，喷金或蒸碳。

以上四个步骤，根据所使用的SEM成像的真空模式，可以有所省略。

如果用ESEM，取样后可直接放入样品室，在一定“环境真空”下进行观察；如果采用LV模式，直到干燥，可以免喷金；高真空模式，必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站：中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程，生物样品因含水，其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个，不好点开，请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

1样品在2.5%的戊二醛溶液中4℃固定过夜，然后按下列步骤处理样品：

2倒掉固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；

3用1%的锇酸溶液固定样品1-2h；

4倒掉固定液，用0.1M，pH7.0的磷酸缓冲液漂洗样品三次，每次15min；

5用梯度浓度（包括50%，70%，80%，90%和95%五种浓度）的乙醇溶液对样品进行脱水处理，每种浓度处理15min，再用100%的乙醇处理一次，每次20min；最后过度到纯丙酮处理20min。

sem前处理脱水目的：脱水至无水状态，为减缓其挥发速度，退回至85%脱水剂，取出，空气中自然干燥。

优点：脱水剂为低表面张力物质，挥发过程中减少了样品的收缩及损伤

缺点：常常使样品发生变形收缩

适用范围：铸型或体表比较坚硬的甲壳昆虫等含水量较少的样品

---