蛋白质凝集与聚集

蛋白质凝集与聚集,第1张

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蛋白质变异应该是某个氨基酸变成了其他的氨基酸,这可能是由于编码该蛋白质的核苷酸在复制或转录时发生了缺失、替换等而引起读码框的前移、后移或突变,最终导致所翻译蛋白质序列的变化。

蛋白质的变异应该是凝集。

分辨凝集还是凝固最简单的办法就是看它是否能复溶。像豆腐,凝固了之后就不溶了。

希望对您有帮助。

浓缩胶导致蛋白质样本浓缩聚集的原理:浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。

当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。

配制方法

一般同工酶可选择7?5%~10%的胶(过氧化物酶和酯酶7?5%较合适,超氧化物歧化酶用10%,可溶性蛋白可根据需要配制)。将配制好的凝胶液置真空干燥器中,抽气10Min,再加入TEMED15μl;混匀后用一细玻棒引流,沿无凹槽的玻板缓缓注入胶室中,注胶过程要防止气泡产生。

拍蛋白胶用什么成像系统,最常用的成像技术有:

1. 光学显微成像:通过光学显微镜、定量普通照相机、激光扫描共焦显微镜等等来观察和分析蛋白胶。

2. 电子显微成像:包括扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)等,用于分析蛋白胶的细胞结构和组织结构。

3. 红外成像:可以用于快速测定蛋白胶的含量和结构。

4. 半导体成像:用于检测蛋白胶的表面形貌和结构。

5. X射线衍射:可用于测定蛋白胶的结构,也可以用于研究蛋白胶的形态变化。

6. 光谱成像:可以用于检测蛋白胶的分子结构。

7. MRI:用于研究蛋白胶的数量和组织分布。


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