如何分析胞外聚合物

如何分析胞外聚合物,第1张

微生物的胞外聚合物(ECP)是微生物在一定条件下,在其代谢过程中分泌的、包围在微生物细胞壁外的聚合化合物,包括荚膜、粘液层以及其他表面物质。经过分析可以知道,这些聚合物的成分为脂类、多糖蛋白质等。微生物胞外聚合物可以应用于多种工业,如:石油开采工业、农业、环境保护和环境工程等方面。其主要作用表面活性剂、絮凝剂或助凝剂和沉淀剂

(1)胞外聚合物的提取

胞外聚合物(Extracelluler

Polymer

Substances,

EPS)与细胞结合紧密,需要特定的方法才能将其从污泥中分离提出。在本实验中采用Frølund等人[

]的方法来提取活性污泥表面的胞外聚合物。

首先,从反应器中取50mL活性污泥样品,在2000g、室温下离心15min后倒出上清液。离心后再向留在离心管内的生物体加入由526mg•L-1

NaCl,74.56mg•L-1KCl,760.2mg•L-1Na3PO4和552mg•L-1NaH2PO4组成的磷酸盐缓冲溶液,使之再次呈悬浮液态。再将悬浮污泥样品移入烧杯中,在其中加入90g•gMLVSS-1的离子交换树脂(732阳离子交换树脂)并以600rpm转速搅拌2h,使之混合。混合后再于4000g离心300min以去除树脂和生物体,上清液则为EPS提取液[

]。

(2)胞外聚合物的分析方法

EPS提取物中主要是多糖、蛋白质和DNA。多糖的测定采用蒽酮—H2SO4比色法[

]。即高温下糖类会被H2SO4脱水生成糠醛或糠醛衍生物,并与蒽酮(C14H10O)缩合成蓝色化合物,在620nm处测定吸光度(721型分光光度计),以葡萄糖的标准曲线可换算出多糖的含量[

,

]。

蛋白质采用紫外吸收法测定,同时测定260nm和280nm处的吸光度,利用下式计算蛋白质的浓度(mg•mL-1):ρ蛋白质=1.45×A280nm-0.74×A260nm,该方法可消除样品中和算对测定值的干扰。EPS的含量最终以单位质量MLVSS中各成分的总量计。

DNA的测定采用修正的Brunk方法[

],主要试剂为:用100

mM

NaCl中配制0.2

ppm

DAPI试剂

(4,

6-二咪基-2-苯基吲哚),10

mM

EDTA,10

mM

TRIS,pH

7。步骤:

将100

µL的

EPS

提取液用吸液管装入试管中并加入2.5

ml上述试剂。直接测定样品(激发波长360nm、发射波长450

nm),Salmon实验采用标准方法。

EPS是EarningsperShare的缩写,即每股收益,也称每股盈利,指公司净利润与其已发行股票数量的比率,是普通股股东每持有一股所能享有的企业净利润或需承担的企业净亏损。EPS用于确定公司相对于其他公司的实力以及跟踪绩效。

将一家公司与其他公司进行比较时,更高的每股盈利被视为更强大的业务标志。在将某公司当业绩与其早期业绩进行对比时,EPS的增加,表明盈利能力提高。EPS下降,则说明公司盈利能力有下降。

公司的EPS是用于评估业务和做出投资决策的最重要工具之一。投资者和分析师仔细分析每股盈利报告(通常是季度和年度财报),以衡量公司相对于预期收益的表现。


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