如何组装、调试显微镜?

一、使用方法

1．观察前的准备

（1）置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为一寸左右。镜检者姿势要端正，一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左右眼均能观察。

（2）显微镜是光学精密仪器，在使用时要特别小心，使用前要熟悉显微镜的结构和性能，检查各总零件是否完好无损。镜身有无灰尘，镜头是否清洁，做好必要的清洁和调整工作。

（3）调节光源　对光时应避免直射光源，因直射光源影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头，并刺激眼睛。

3．高倍镜观察。

将高倍镜转正至正下方，在转换接物镜时，需用眼睛在侧面观察，避免镜头与玻片相撞。然后由接目镜观察，再仔细调节光圈和聚光镜，使光线的明亮度适宜，同时再仔细正反两方向微转动细调节轮，直至获得清晰的物象后为止，找到最适宜于观察的部位。需进一步要观察的部位移视野中央，准备用油镜观察。

4．油镜观察：

（1）上升聚光器，全开虹彩光圈。

（2）用粗调节轮提起镜筒或下降载物台，转动转换器将油镜转至镜筒正下方。在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向慢慢转动粗调节轮使镜筒下降或载物台上升，与此同时，从显微镜的侧面观察使油镜浸入油中，直到几乎与标本接触时为止。注意不要压到标本，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头。

（3）从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节轮将镜筒徐徐上升或将载物台徐徐下降，直到视野内出现物像为止，然后用细调节轮校正焦距。如油镜已离开油面而仍未见物象，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物象看清为止。

（4）换片观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油竟镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油竟镜）下换片，以防损坏镜头。

二、显微镜的保养

（1）油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再取一张擦镜纸，滴上少量的二甲苯擦拭，然后再取另一张新擦镜纸将镜头上残留的二甲苯擦净。否则粘固透镜的胶质会被二甲苯溶解，日久镜片易移位脱落。

（2）下降聚光器，打开虹彩光圈，使反光镜垂直于镜座，以免积聚灰尘。

（3）用绸布将镜身擦拭干净（切不可用手擦拭），除去灰尘、油污、水汽，以免生锈长霉。

（4）使显微镜的各部件恢复回原位，下降镜筒，使物镜呈“八”字形置于载物台上，然后将显微镜送回镜箱中。

（5）显微镜应存放在干燥阴凉的地方，不要放在强烈的日光下暴晒，霉雨季节应在显微镜箱内放置干燥剂（硅胶），如长时间不用，则光学部分应卸下放在干燥器中，以免受潮生霉。

（6）显微镜应严禁与挥发性药品或腐蚀性药品放在一起，如碘片、盐酸、硫酸等药品。

三、注意事项

（1）．拿取显微镜必须一只手拿着镜臂，一只手托着镜座，并保持镜身的上下垂直，应避免震动，轻放台上。切不可一只手提起，以防显微镜、反光镜功目镜坠落。

（2）．使用前应将镜身擦拭一遍、用擦镜纸将镜头擦净（切不可用手指擦抹）。若遇到镜台或镜头上有干香柏油，可用擦镜纸沾取少量二甲苯将其擦去。

（3）．使用时如发现显微镜操作不灵活或有损坏，不要擅自拆卸修理，应立即报告指导教师处理。

（4）．注意保护镜头，切不可压碎标本被片，损坏镜头。

（5）．显微镜使用完毕，应登记显微镜使用卡经指导教师检查后放回镜箱。

显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜分光学显微镜和电子显微镜：光学显微镜是在1590年由荷兰的杨森父子所首创。

显微镜是人类这个时期最伟大的发明物之一。在它发明出来之前，人类关于周围世界的观念局限在用肉眼，或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。

为了使显微镜的视野能受到均匀而又充分的照明，在显微镜初次安装和调试时，就必须把照明光路系统调整好，这是正确使用显微镜，并获得正确、可*结果的重要手段和最基本的要求。此外，正确掌握照明光路系统的调整，是使用显微镜过程中更换光源灯泡后所必经的步骤，也是在日常使用过程中不时地检验显微镜性能的必要手段。显微镜照明光路系统的调整主要有以下4项内容：

1．照明光源灯室在显微外的初步调整

① 首先将灯室的外壳打开，压弹簧夹子将卤素灯泡装入插座中，安装时避免手指直接接触灯泡（可用柔软的布或纸隔住），以免灯泡上留有指纹等脏物，影响灯泡的使用寿命。

②把灯室摆在桌面上，接通电源后，用专用的螺丝刀调节灯的调焦旋钮孔（标有“←→”），使灯丝投影在1-2m外的墙上，将灯丝成像调至清晰；然后调节灯的高低位置调节丝孔（标有“──”），使灯丝位置高低适当；再调节灯的左右位置调节螺丝孔（标有“──”），使灯丝左右位置合适。

2．光源发光体（灯丝）在显微镜内位置的检验和校正　目的是为了把发光体的像端端正正地调入物镜的视域范围内，从光源的角度去确保显微镜的视域受到充分而均匀的照明，这是调整库勒照明系统的前提条件。需要的基本工具：对中望远镜购置显微镜时已配备。

① 拔掉灯库内的毛玻璃套筒，把灯室装回显微镜上

②选用10×物镜，开亮光源程序找样品并调焦清晰，再换用40×物镜把样品调焦清晰（40×物镜可以看清灯丝的全貌）；

③把聚光镜的孔径光阑和视场光阑均开到最大；

④拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，抓住白色部分，另一手伸缩黑色接目镜，就可在视野中看到灯丝像；

⑤如灯丝位置不合适，调“──”孔，把灯丝像沿水平方向调好，调“──”孔，把丝像沿垂直方向调好，直至将灯丝像调至刚好充满物镜孔径的光圆像；

⑥调整完毕后，将毛玻璃套筒插回原位，拔掉对中望远镜，换回目镜作下一步调整。以上所述照明光源灯室在显微镜外的调整和光源发光体在显微镜内位置的校验，只需在显微镜初次安装调试及更换灯泡时进行，平时使用显微镜时不能随意乱调乱动。万一调乱时，可按上述步骤调回原状。

3．库勒照明（Kohler）系统的正确调整　显微镜的正确调试，主要工作之一是照明光路系统的调整，而其中的关键是库勒照明系统的调整。对于每一位使用显微镜的人员，特别是作显微照像的人员来说，应该对库勒照明系统的原理及其调整步骤有一定的了解和掌握，才能充分发挥显微镜应有的功能，拍出来的照片才能在效果上比较一致而又完善。库勒照明系统的原理简单来说就是：光源发光体上任意一点发出的光，可以照明显微镜的视域范围，而光源发光体上每一点所发出的光汇集起来，在显微镜的视域中就实现了非常充分而又均匀的照明。调整库勒照明系统的目的，是为了使所观察的视域能获得均匀而又充分的照明，防止杂散光对照像系统造成影响或干扰，以免照像时在底片形成灰雾。高调整库勒照明系统的必要部件：视场光阑、可进行合轴调整的聚光镜系统。

① 选用10×物镜和10×目镜

② 把聚光镜前端透镜摆进光路中，孔径光阑调至适中的位置上（不大不小），再把聚光镜升到最顶的位置上，聚光镜转盘调至明视野“J”位置

③ 把视场光阑调至最小（0.1）

④ 载物台上放上已封片的生物样品，开亮光源，调焦清晰

⑤ 视域中会出现一个局部照明的区域或亮斑，这是视场光阑的模糊像，在其中可以清晰地看到样品的细节；在它之外是较暗的视域，不一定能把样品的细节看得清楚

⑥把聚光镜微微地向下调，使视野中的亮斑逐渐收小，慢慢变成一个清晰的多边形象，这便是视场光阑的清晰像；

⑦一般情况下，多边形象并不在视域中央，需要调整聚光镜的一对调中螺丝，把视场光阑多边形的像调至中央位置；

⑧逐渐开大视场光阑，使多边形象成为视域的内接多边形，进一步核对调中的状况，如对中不够理想，继续微微调对中螺丝；

⑨将视场光阑稍为再微微开大一些，使它的多边形象恰好消失在视域的边缘上，至此，库勒照明系统调整完毕。库勒照明系统调整好以后，整个视域照明均匀，拍摄的显微照片明亮清晰，反差正常。在日后使用过程中应特别注意： a. 视场光阑不可任意开大，但可随物镜倍数的增大而将视场光阑收小，随物镜倍数的减小而开大； b. 聚光镜的高低位置不准乱调，否则会破坏已调整好的库勒照明系统； c. 使用10×以下物镜时要将聚光镜前端透镜摆出光路外，使用10×或10×以上物镜时要将前端透镜摆入光路中； d. 关于物镜倍数与视场光阑大小配合问题，在实际使用过程中，作为一般观察不一定要收小或开大视场光阑，但作显微照相时，为了避免杂散光线对照相系统的干扰，以便能拍摄到较完善的照片，则应在使用每一个倍数的物镜时，把视场光阑调节到正好消失于所观察的视域边上，这是比较繁复的工作，但又非做不可。较为简便的方法是把与各个倍数物镜相对应的视场光阑事先调整好，并作好记号，以后使用时根据记号直接调至相应的位置。

4．孔径光阑的正确使用　由于聚光镜的孔径光阑可以影响显微镜的分辨率，使用时应掌握正确的使用方法。过去由于对孔径光阑的认识不足，往往把它当作是调节视野亮度的工具。虽然调节孔径光阑在一定程度上可以改变视野的亮度，但会直接影响成像的反差、对比度及分辨率，在使用过程中应尽可能避免。为了发挥聚光镜孔径光阑的作用，以便在观察时，尤其在作显微照相时获得最佳分辨率，在每换用一个倍数的物镜时，在样品调焦清晰后，需要调节孔径光阑，使它的大小正好等于所用物镜数值孔径（物镜孔径像）的2/3 。调整方法是用对中望远镜对焦于视野中黑色相差环上，调节孔径光阑，可以看到一个多边形的孔径光阑像，然后调到等于物镜孔径像的2/3，即介于黑色相差环外与圆形视域内之间。为方便起见，可把与各倍数物镜相对应的孔径光阑预先调整好，并作好标记，以免每次使用都要重新调整。 显微镜成像光路系统的调整，是根据不同显微镜检术的需要而进行的。所谓显微镜检术（microscopy），概括而言就是以显微镜观察样品时所使用的照明方法，以及如何使样品所成的像能获得更良好反差的技术与方法。以下简述显微镜检术中已成熟的几种方法及对应的显微镜成像光路系统的调整方法。

1．透射光明视野：

这是自显微镜发明以来最传统、最普遍的应用方法。基本部件： a. 物镜：任何物镜都可作明视野观察； b. 聚光镜：各种聚光镜均可，最好配有孔径光阑。调整方法：在上述显微镜的库勒照明系统调整好后，即可应用明视野法。适用范围：所有已染色的组织切片、血液涂片等。注意事项： a. 使用明视野方法观察时，一定要将库勒照明系统调整好； b. 视场光阑不可任意开大，使用10×、10×以下和10×以上物镜时，要将聚光镜前端透镜分别摆事实出和摆进光路中； c. 不可用聚光镜的孔径光阑来调节视野的亮度，更不要乱调聚光镜的高低位置，否则，会降低显微镜的分辨率和破坏已调整好的库勒照明系统； d. 作显微照相时，每换用一个倍数的物镜，就要调节聚光镜的孔径光阑，使它的大小正好等于所用物镜数值孔径的2/3 。

2．透射光相差法：

这是现代显微镜检术中的一种反差增强法。基本部件：相差物镜、明视野与相差兼用的多用途聚光镜、对中望远镜、绿色滤光片。

调整方法：

a. 在库勒照明系统调整好的基础上，用明视野方法把样品调焦清晰

b. 把聚光镜转到Ph1对准转盘刻度线位置，选用10×相差物镜，换上待观察的透明样品

c. 拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，并调焦于视野中的两个相差环上（物镜的黑色相差环和聚光镜的透光相差环）

d. 视野中的两个相差环不一定重合，调节聚光镜上的两个调节装置（调整相差环左右位置的调节杆和调整前后位置的摩擦式转钮），使透光环作前后左右移动而与黑环重合

e. 调整好后，换回观察用目镜，将绿色滤光片按入光路中，即可观察到样品的相差像

f. 有20×和40×物镜观察时，聚光镜应设在Ph2位置上，用100物镜时，聚光镜应设在Ph3位置上。

适用范围：适用于观察透明、未染色或不能染色的样品，如各种细胞、活组织、未染色或不染色的组织切片、水生生物等。

3．微分干涉相衬法：

为了克服相差法观察时样品细节像周围伴随有光晕，会掩没掉本来应该看见的细节，以及样品或组织切片厚度要求相当薄，原则上下能厚于10?m等局限性，利用双光束干涉的原理设计子微分干涉相衬法。

调整方法：

a. 必须在库勒明系统已调好的基础上才能调好DIC方法

b. 先用10×物镜，以明视野先确定好能把样品看清晰的物镜调焦位置

c. 把起偏器（polarizer）摆入照明光路中，注意其取向应为东—西方向

d. 把聚光镜转盘转到与10×物镜对应使用的位置上，即DIC 0.3—0.4

e. 在物镜后方或物镜转换器上插入10×物镜使用的DIC插片（DIC slider）

f. 把检偏器（analyser）插入成像光路中，注意其取向应为南—北方

g. 换上待观察的透明样品，开亮光源把样品调焦清晰

h. 调节DIC插片，使微分干涉相衬的像达到最佳效果，也就是浮雕效果最为明显

i. 同时可调节聚光镜的孔径光阑，使反差的效果也达到最佳

j. 然后再细微调样品的细节，可见样品中不同层面上的结构

k. 如果把补色器（first order red retardation plate）插入，并同时调节DIC插片，可在视野中看到不断变化的绚丽色彩，红、橙、黄、绿、蓝、紫、粉红、粉紫及金黄色都具有。适用范围：透明或不能染色的组织切片，厚度可达100?m左右，培养中的活组织和活细胞、小生生物等。

4．落射光激发的荧光法（incident-loght fluorescence Epi-FL）：

简称为落射荧光法，是近代显微镜检术中新发展出来的一种强有力的反差增强法。它将激发荧光用的光源改在物镜的上方，光由物镜上方经反光镜射入物镜去激发样品，从样品上被激发的荧光经物镜成像并穿透反光镜而由目镜观察。该方法较简便，效率高，50W的光源强度比透射荧光法的250W还强。荧光方法是利用波长较短的紫外光、紫光、蓝紫光、蓝光及绿光等去激发样品，只要样品中含有可产生荧光的成分，它便吸收短波的激发光而释放出波长较长的荧光。不同物质只能吸改特定波长的激发光，而释放的荧光也会有特定的波长，因而用作特异性的鉴定十分有效，如某些致病的细菌和螺旋体，受紫外光激发后能发出它们特有的荧光，很容易作出鉴定，这种利用物质吸收激发光后放出特有荧光的方法称为自发荧光法。某些物质自身不会吸收激发光，或吸收后不能释放荧光，但可以吸收或吸附特定的荧光色素或染料，而这些特定的荧光色素或染料也只能吸收特定的激发光，再释放出特定的荧光，从而间接地鉴别出某种物质，这称为间接荧光法。上述荧光方法广泛应用于医学、生物学及工业的特异性研究和鉴别上。调整方法：荧光显微镜或附有荧光部件的显微镜，调整的方法大致相同。

① 汞灯的安装：

a. 打开包装，取出汞灯将其小心安装在上电极散热帽上，安装时注意手指不能直接接触灯管和散热帽的正面，汞灯的封气口要对向散热帽的左侧或右侧

b. 把汞灯的上电极引张安装并固定在散热帽底面的小孔上，再把汞灯的下电极及上电极引线另一端，分别安装在灯座上各自的插孔中并固定

c. 锁紧散热片上的螺丝后，把汞灯连同灯座及散热帽小心装入灯室中，锁紧相应的螺丝，再把灯座上的连线和插座插到汞灯电源后部专用的插座上。

d. 详细的安装方法请参照有关说明书。

② 汞灯灯室在显微镜外的初步调整：

a. 接通汞灯电源，让汞灯预热10-15min

b. 把汞灯灯室摆放在桌面上，让汞弧投影到2-3m外的墙上，划一条与灯室窗口中心线对地高度一样的水平线作为参考线

c. 转动灯室调焦旋钮，使汞弧的像清晰地投影于墙上

d. 分别调节灯室外壳上的5个调节螺丝孔，把汞弧的像其反射像调成并排且尽量*近，但不要重叠在一起。

③汞灯汞弧在显微镜内位置的检验：

a. 将汞灯照明光路系统中的视场光阑开到最大

b. 把荧光滤光片组推到蓝光激发的位置上，以避免汞灯中的蓝光太刺眼

c. 把观察的样品或一块载玻片放在物台上，盖上一张比盖玻片稍大且洁白的薄纸

d. 取下一个物镜，使激发的蓝光经物镜转换器的空档照在白纸上，白纸上会有一蓝色的圆形照明区域，汞弧的像及其反射像都应该出现在这区域的中央部位，否则，可调节灯室调焦旋钮至最清晰，然后分别调节灯室外壳上的5个调节螺丝孔，直至汞弧的像及其反射像并排在照明区域的中央位置。

e. 调好之后，把物镜装回去，通过目镜可见白纸被蓝光激发后发射出的黄绿色荧光

f. 仔细调焦，可看清白纸的纤维；取去白纸，样品上的荧光细节隐约可见而很容易调焦清晰。

④汞灯使用注意事项　通常使用的为50W超高气压汞灯，灯管内通有一对钨电极和液态汞（室温下附在管壁上），未点燃时，管内气压很低，在灯管的两电极间施加电压角发点燃后，汞气化为汞蒸气形成汞弧而产生强光，温度升高，管内气压迅速升到10个大气压。由于是高气压的气体放电，必须了解其特性才能安全地使用汞灯。

a. 汞灯接通电源后需要10-15min预热时间，汞才能充分汽化并形成汞弧，产生高亮度而稳定的激发光。因此，观察前要提早通电

b. 汞灯在使用过程中，不要随意开关汞灯的电源

c. 关掉汞灯电源后，必须等待15-20min，待汞灯自燃冷却后才可再次接通电源，违反这一操作规定时，将会造成严重后果！由于汞灯内的汞蒸气未完全液化，汞蒸气内阻很小，一旦通电在两电极间施加电压，汞灯内形成强大的电流，轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈，重则汞灯爆炸，汞蒸气弥漫整个实验室，造成工作人员中毒，不仅损失了汞灯，还会炸毁灯室内的集光-聚光部件。

d. 汞灯的使用寿命一般只有300h，使用得当可达600h，使用寿命与开关的次数成反比，应集中一批样吕作2-3h的观察。汞灯价格及昂贵，应珍惜使用。

e. 汞灯寿命终结的标志是点燃困难，灯管发黑。

5．暗视野法（dark field）：

许多透明或半透明的样品，如细菌、微生物、细胞内的精细结构及结晶体的内含物等，在明视野显微镜中不容易看清楚，如果采用暗视野法就可以大大提高样品的可视度。以暗视野法所看到的是衬托在黑暗视野背景中发亮的样品轮廓及其细节。普遍光学显微镜的最高分辨率为0.2μm，而暗视野显微镜虽然对样品的细节构造分辨不清楚，但却可看到0.004μm以上微细颗粒的存在，即可以看到亚显微结构，特别适合用来观察微细的颗粒与细菌等。调整方法：暗视野法的主要必需部件是暗视野聚光镜。使用时须先用明视野聚光镜把库勒照明系统调整好。换上暗视野聚光镜时，要把载玻片（样品）移开，将浸没油滴在聚光镜顶部，再把样品载玻片搁在物台上，浸没油便充填在两者之间，这种聚光镜须与装有可变光阑的100×油镜配用。另一种中倍率干式暗视野聚光镜可与中倍率的物镜配用，这种聚光镜具有中央光挡，照明光只能透过光档与聚光镜边缘之间的透光环才能进入聚光镜内。对于配备齐全的相差显微镜，与编号为Ph3物镜配用的相差聚光镜相差环，可以和10×及10×以下的相差物镜配用而形成低倍率的暗视野效果。

体视显微镜光轴校正

体视显微镜光轴校正，显微镜一般情况下我们只能在实验室见到，这是一种精密的可以观察细胞的仪器，寻常人很少接触，因此对于它的操作事项一无所知，下面分享体视显微镜光轴校正。

体视显微镜光轴校正1

在体视显微镜的光学系统中、光源、聚光镜、物镜和目镜的光轴以及光阉的中心必须与显微镜的光轴同在一直线上。在设计上，显嫩健的光轴应该是一致的，但在使用时还必须将光轴的中心调整好，尤其在各类研究用显微镜的操作中至为重要，否则难以取得观察和显微照相的效果。体视显微镜的目镜安装于固定的位置上。没有调正的必要，而物锐的中心是取决于物镜转换器的精度(体视显微镜的物镜可调正)，现将柯勒照明的调整步级阐明如下:

(1)聚光镜灯丝的调正:开启光源开关，在视场光阑处放置乳白磨砂滤光片或一张白纸，同时缩小视场光阑，此时可看到有灯丝像的出现。调正时。利用灯室外方三个旋钮进行调正，其中一个旋钮可调正灯泡的前后，直到灯丝像较清晰，如灯丝不在中央，则利用其他二个旋钮作上下，左右调正，直到灯丝像完全调至中央为止，有的厂家生产的体视显微镜，灯室外侧没有调节旋钮，这是因为所指定的专用灯泡，在安装确当后则无需调正(如Olympus BH系列显微镜)。

(2)聚光镜的中心调正:先将视场光阂缩小，用10x的物镜观察，在视场内可见到视场光阑的轮廓像，如不在视场的中央，则利用聚光镜外侧的两个调正螺丝将其调正至中央部分，当级慢地增大视场光阑时，能看到光束向视场周缘均匀展开直至视场光阑的轮哪像完全与视场边缘内接，说明已经合轴，合轴后再略为增大视场光阑，使轮脚像刚好处于视场外切或稍大一些，这样最适于作观察之用。

(3)孔径光阑的调节:孔径光阑安装在聚光镜内，研究用体视显微镜的聚光镜的外侧边缘上均具有刻数及定位记号，这样就便于调节聚光镜与物镜的数值孔径相匹配。但有的聚光镜外侧没有标刻数字，这样先将物镜聚焦，再取下一目镜，眼睛往镜简内看，可见物镜后透镜呈一明亮的圆，如看不见孔径光阑的轮脚像，说明开的过大，若仅是一个很小的明亮轮脚像，则说明缩得过小，当缓慢增大刚好与物镜后透镜呈一明亮的圆时，则聚光镜与该物镜的数值孔径已相当匹配。

体视显微镜光轴校正2

首先将灯泡的外壳打开，将卤素灯泡装入插座中，安装时避免手指直接接触灯泡，以免灯泡上留有指纹等脏物，影响灯泡的使用寿命。

第一步，显微镜摆在试验台，接通电源后，用专用的螺丝刀调节灯的调焦旋钮孔，将灯丝成像调至清晰；然后调节灯的高低位置调节丝孔，使灯丝位置高低适当；再调节灯的左右位置调节螺丝孔，使灯丝左右位置合适。

光源发光体在显微镜内位置的检验和校正，目的是为了把发光体的像端端正正地调入物镜的视域范围内，从光源的角度去确保显微镜的视域受到充分而均匀的照明，这是调整库勒照明系统的前提条件。需要的基本工具：对中望远镜购置显微镜时已配备。

拔掉灯库内的毛玻璃套筒，把灯室装回显微镜上；选用10×物镜，开亮光源程序找样品并调焦清晰，再换用40×物镜把样品调焦清晰(40×物镜可以看清灯丝的全貌)；把聚光镜的孔径光阑和视场光阑均开到最大；拔掉其中一个目镜，换上对中望远镜，抓住白色部分，另一手伸缩黑色接目镜，就可在视野中看到灯丝像；

如灯丝位置不合适，调“——”孔，把灯丝像沿水平方向调好，调“——”孔，把丝像沿垂直方向调好，直至将灯丝像调至刚好充满物镜孔径的光圆像；

调整完毕后，将毛玻璃套筒插回原位，拔掉对中望远镜，换回目镜作下一步调整。以上所述照明光源灯室在显微镜外的调整和光源发光体在显微镜内位置的`校验，只需在显微镜初次安装调试及更换灯泡时进行，平时使用显微镜时不能随意乱调乱动。万一调乱时，可按上述步骤调回原状。

体视显微镜光轴校正3

1、定位精度：是指物镜镜头处于工作状态时，转化器(转化盘)必须明确与稳定，它的视野中心对于其他物镜，处于同样工作状态时，视野中心的偏移量而言，一定是一致的。换句话说，就是转换哪一个镜头，都应该在一个相同的位置，不能够有偏移。

定位精度调整与观察：物镜在转换器转换以后，用不同的放大倍率的物镜，观察物镜的光轴的不重合。可先用10×物镜调焦后，以其中心为基准，再转换到40×物镜时，中心移位不得超过视场的半径的2/3，以40×物镜为基准，转换到100×物镜时，中心位移不得超过视场半径的3/4。显微镜的精密度越高，位移越小，高级研究显微镜甚至是一致，这是考量显微镜优劣的标准之一，更是考量使用者的水平标准。为什么?这么说?我们80%的使用者，都是以手拧着镜头进行倍率的转换，长期多次、如此操作，导致镜头的衔接丝扣损伤和松动，破坏了其精度造成的后果。正确使用是以手持转换盘(上面刻有条纹显示)转换镜头，保持显微镜的定位精度。

2、齐焦精度：指的是一个显微镜物镜镜头，调节在一个工作的位置后，再转换另外一个镜头的时候，应该在不重新调节焦距的情况下，就可以看到物象。例如从低倍转换到高倍镜头观察时，仍然可以看到标本的轮廓，其精确度在0、03毫米范围内，允许调焦就可以观察清楚，否则为齐焦精度不够。油镜的观察可以与其镜头不必齐焦，因为介质不同，一个是干系统，一个是油浸系统。但是注意，在油镜转换时不要使镜头碰到盖片，如果碰到的时候，说明盖片厚度超过了规定的厚度，属于不合格产品，其盖片厚度要求，在油镜头上明确书写。

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