羧基的保护方法

保护羧基的方法主要是酯化法，但在某些情况下，也可以用形成酰胺或酰肼等方法来进行保护。

酯化法保护羧基：甲酯和乙酯

甲酯和乙酯作为羧酸的保护基对一系列合成操作十分适用。例如，以酯的形式进行的烷基化反应和各种缩合反应,随后酯基在酸或碱的催化下水解除去，偶尔酯基也可用热解反应消去。但简单的烷基酯作为羧酸的保护基在有些情况下并不适用，其原因往往是由于最后需用皂化反应来除去酯基。因此，实际上在合成中常甲基和乙基的衍生物取而代之。甲基的衍生物主要是苄基类型，可用温和条件下的酸处理或氢解脱除。乙基衍生物主要是β，β，β2三氯乙基等

酯化法保护羧基：叔丁酯

叔丁酯不能氢解，在常规条件下也不被氨解及碱催化水解，但叔丁基在温和的酸性条件下可以异丁烯的形式裂去。此性质使叔丁基在那些不能进行碱皂化的情况下特别吸引人，例如：用于酮、β2酮酯、α，β不饱和酮和对碱敏感的α2酮醇以及肽的合成。在青霉素的合成中，可选择性地裂开叔丁酯以便形成β2内酰胺；在菌霉素的合成中和在容易还原的酮的制备中，都可用叔丁基来保护羧基。四氢吡喃酸具有和叔丁酯相似的对酸的不稳定性，这一保护基也类似地用于丙二酸酯类型的酮和酮酯的合成中。

酯化法保护羧基

苄基、取代苄基及二苯甲基酯类

这类酯保护基的特点在于它们能很快地被氢解除去。在青霉素合成中，苄酯不被温和的酯水解条件破坏，最后需由氢解除去苄酯；在谷酰胺和天门冬酰胺的合成中，以及在L2谷氨酸和L2天门冬氨酸酯的制备中，苄酯的性质都能典型地显示出来。Bowman和Ames将苄基酯用在活性酯(有α2活泼氢)的烷基化或酰基化中，此法曾出色地完成脂肪酸、酮、二酮和α2醇酮的合成。芳环上或次甲基上有取代基的苄基在用酸性试剂脱去时，其敏感性可有大幅度的改变。Stewevr在酯肽类合成中利用了亚甲苄酯易于催化脱去的优点，用其代替叔丁酯。苄酯和对硝基苄酯也可作为羧基的保护基，一个典型的例子就是其在氨基的酰化衍生物合成中的应用。在苯酯和缩酚酸的合成中，二苯甲酯具有相似的作用，但二苯甲酯在酸存在条件下的溶剂化分解太快，因此在酸性条件下不易作羧基保护基。总之，这类酯是一种有价值的保护基，其制备可用经典的方法及前述的反应制备。

用酰胺和酰肼来保护羧基

在有限的范围内人们采用酰胺和酰肼的形式保护羧基，从其解脱方式的角度补充了酯类保护作用的不足。酰胺和酰肼对解脱酯类的温和碱性水解条件稳定，但酯类对能有效脱解酰胺的亚硝酯和用于裂解酰肼的氧化剂又均稳定，二者可以互补。

制备酰胺和酰肼的经典方法是以酯或酰氯分别与胺或肼作用制备，也可直接从酸制

得。酰肼已被用于抗菌素和肽的合成，在肽的合成中它们可被亚硝酸转化为叠氮化物,使得缩合反应容易发生。

酯的保护

酯和内酯的保护可视为羧基的间接保护，而且酯须有α2活泼氢，否则反应很复杂。酯在引进保护基后，可在很多条件下保持稳定，如HOAc/H2O/THF(25℃，1h),KOH/MeOH(25℃，12h),LiAlH4/Et2O(25℃，3h),CH3Li/Et2O(25℃，2h)等。可用汞盐或三氟化硼脱去脂保护基。

综上所述，保护羧基的方法虽然不多，但作为保护基的酯的种类却不少，且各有特色。

使用扫描隧道显微镜STM和分子吸附辅助原子力显微镜AFM的确是可以基本上达到原子量级的分辨率没有问题.不过有一点就是题主的问题是电子显微镜,一般而言电子显微镜的是使用electron beam 来进行成像的手段,主要也就是TEM和SEM两大种,当然还有就是这两种设备的一些辅助功能,诸如高分辨的TEM和Stem.不知楼主的提问是想知道不论任何方式能够看到羟基和羧基就可以,还是需要用 电子显微镜 这种手段来进行分析. 扫描隧道显微镜和原子力显微镜都是利用距离跟进,一个产生隧穿电流,一个是范德瓦耳斯力,而直接相当于描出表面的形貌.但对于电子显微镜,首先对于SEM,也就是扫描电子显微镜而言,是必然无法看到羟基和羧基的,甚至是连大分子都无法看到.如果不去考虑研究晶体取向的问题的话,可以吧扫描电镜看成是一个牛逼的放大镜,传说最牛逼的分辨率能到0.8nm,但是一般情况能达到1.5nm的个人感觉就挺牛逼了.对于TEM,目前想要高分辨率就一般是使用HRTEM,也就是好点的透射电镜的高分辨功能了.但是高分辨功能是通过电子衍射成像,也就是呈现一个格子像,。