要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤

要对细菌做SEM,前处理是什么?需要把细菌弄成干态或者固定是吗?求详细的步骤,第1张

取样,戊二醛等固定液固定,酒精梯度脱水,冷冻干燥or二氧化碳临界点干燥,喷金或蒸碳。

以上四个步骤,根据所使用的SEM成像的真空模式,可以有所省略。

如果用ESEM,取样后可直接放入样品室,在一定“环境真空”下进行观察;如果采用LV模式,直到干燥,可以免喷金;高真空模式,必须做到喷金等样品导电处理。

具体可到公益网站:中山大学生物电子显微学实验室网站查询

扫描电镜样品制备: 基础课程,生物样品因含水,其样品制备有其特殊性。

http://bioem.sysu.edu.cn/wiki/index.php/%E9%A6%96%E9%A1%B5

有时候公益网站有点那个,不好点开,请看转载链接http://coxem2010.blog.163.com/blog/static/16510375720114192413945/

扫描电镜成像原理主要有两种,二次电子像(secondary electron):形貌衬度,就是你的细菌外表有凸凹形貌,可以拍摄形貌像;背散射电子探头(back scatter electron):原子序数衬度,你可以进行染色,把一些重金属的盐类设法溶进细菌体内,然后用BSE观察时,细菌就是白亮的。

具体不懂的可以联系我,希望对你有帮助。

一、细胞形态不同

1、细菌为很多圆球状或小杆状;

2、放线菌,单细胞,呈分枝丝状;

3、霉菌菌丝有隔,分生孢子;显微镜下青霉扫帚状排列的分生孢子小梗,曲霉膨大的分生孢子头(顶囊),分生孢子梗直立于菌丝独特厚壁的足细胞上。

4、酵母菌,是较细菌的单细胞个体明显大得多,形态有卵圆形、球形、腊肠形、柠檬形或藕节形。

二、细胞结构不同

1、细菌: 原核细胞 ,没有细胞核;

2、放线菌: 原核细胞 ,没有细胞核;

3、霉菌: 真核细胞,有细胞核;

4、酵母菌: 真核细胞,有细胞核、细胞壁、细胞膜、细胞质、液泡、线粒体等;

三、菌落特征(群体形态)不同

1、细菌菌落凝胶状、表面较光滑、湿润,与培养基结合不紧密,易挑取,正反颜色一致;

2、放线菌菌落固体培养基上呈辐射状生长,致密、坚硬、多皱、不易用针挑起,不透明。孢子成熟后,表面粉末状,干燥,常有土腥味;

3、霉菌菌落较大,由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状,有的无固定大小,延至整个培养基,产色素,菌落有颜色;

4、酵母菌菌落与细菌菌落相似,但比细菌大而厚,不透明,表面光滑、湿润、粘稠,易用针挑起,多呈乳白色;

四、繁殖方式不同

1、细菌:二分裂
方式;

2、放线菌:孢子生殖;

3、霉菌:孢子生殖;

4、酵母菌:无性繁殖:出芽繁殖;有性繁殖
,通过接合形成子囊及子囊孢子。

五、种属不同

1、细菌是原核生物;

2、放线菌属于原核生物;

3、霉菌都属于真菌;

4、酵母菌属于真菌。

参考资料:

百度百科——细菌

百度百科——放线菌

百度百科——霉菌

百度百科——酵母菌


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